一种细菌的检测方法

摘要

本发明公开了一种细菌的检测方法，包括如下步骤：（1）样品处理：无菌条件下从样本中分离细菌，置恒温培养箱中，培养，获得单菌落；收集菌液，在液氮和35-40℃下，分别反复冻融裂解细菌或超声波破碎细菌，之后消化处理；（2）将目标细菌的抗体连接到磁性纳米球和荧光纳米球表面，得到免疫磁球和免疫荧光球；（3）将免疫磁球和免疫荧光球加入到待测溶液中，得到磁球-细菌-荧光球复合物；（4）利用荧光显微镜磁球-细菌-荧光球复合物进行检测。本发明的细菌通检测方法，可快速鉴别不同细菌，敏感性、准确性优于传统检测方法；具有良好的特异性和较高的敏感性，同时为细菌快速诊断试剂盒研发奠定了技术基础。具有普适性，便于推广。

主权项

一种细菌的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）样品处理：无菌条件下从样本中分离细菌，划线接种于营养琼脂平板、血液琼脂平板和麦康凯平板上，置恒温培养箱中，培养，获得单菌落；单菌落用单菌落接种液体培养基培养；收集菌液，在液氮和35‑40℃下，分别反复冻融裂解细菌或超声波破碎细菌，之后消化处理；（2）将目标细菌的抗体连接到磁性纳米球和荧光纳米球表面，并用牛血清白蛋白对偶联了抗体的磁性纳米球和荧光纳米球进行封闭，得到免疫磁球和免疫荧光球；（3）将免疫磁球和免疫荧光球加入到待测溶液中，孵育使免疫磁球、免疫荧光球和目标细菌充分结合，然后磁分离并洗涤，最后加入生理盐水并重悬均匀，得到磁球‑ 细菌‑ 荧光球复合物；（4）利用荧光显微镜或者荧光光谱仪对磁球‑ 细菌‑ 荧光球复合物进行检测。