一种铁皮石斛生根壮苗专用培养基

摘要

一种铁皮石斛生根壮苗专用培养基。我们发现培养基中添加马齿苋提取物、南瓜粉、丙三醇、苹果酸、邻苯甲酰磺酰亚胺、水苏糖，无根铁皮石斛无菌试管幼苗生根率达到100%，但生根后的平均根数仅为3-5根，且根粗较细；我们对母液V和母液VI的组成进行了调整，使母液V的组成为苹果酸、邻苯甲酰磺酰亚胺、苏糖、丙三醇，母液VI的组成水马齿苋提取物和南瓜粉，发现无根铁皮石斛无菌试管幼苗生根率达到100%的同时，壮苗生根后的植株平均根数达到15-20条，且根系壮，植株生长较快。

主权项

一种铁皮石斛生根壮苗专用培养基，其特征在于：其中母液Ⅰ的配方组成为：NH₄NO₃ 33000mg、KNO₃ 38000mg、CaCl₂·2H₂O 8800mg、MgSO₄·7H₂O 7400mg、KH₂PO₄ 3400mg；母液Ⅱ的配方组成为：KI 166 mg、H₃BO₃ 1240 mg、MnSO₄·4H₂O 4460 mg、ZnSO₄·7H₂O 1720 mg、Na₂MoO₄·2H₂O 50 mg、CuSO₄·5H₂O 5 mg、CoCl₂·6H₂O 5 mg；母液Ⅲ的配方组成为：FeSO₄·7H₂O 5560 mg、Na₂‑EDTA·2H₂O 7460 mg；母液Ⅳ的配方组成为：肌醇20000 mg、烟酸100mg、盐酸吡哆醇100mg、盐酸硫胺素20mg、甘氨酸400mg；母液V的配方组成为：苹果酸50‑65 mg、邻苯甲酰磺酰亚胺10‑20 mg、水苏糖150‑200 mg、丙三醇10‑20 mg；母液VI的配方组成为：马齿苋提取物15000‑20000 mg、南瓜粉5000‑10000 mg；母液V的配方组成为：苹果酸55 mg、邻苯甲酰磺酰亚胺15mg、水苏糖180 mg、丙三醇15 mg；母液VI的配方组成为：马齿苋提取物18000 mg、南瓜粉8000 mg；制作步骤为：（1）母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制：按母液Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ配方组成，分别称量母液Ⅰ、母液Ⅱ和母液Ⅳ所需的各种原料，称量完毕后，分别用300ml蒸馏水溶解，然后分别用蒸馏水定容到1 L，分别得到母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ；（2）母液Ⅲ的配制：按母液Ⅲ的配方组成，将FeSO₄·7H₂O和Na₂‑EDTA·2H₂O称好后分别加入400ml蒸馏水，一边加热，一边不断搅拌使它们充分溶解，然后将Na₂‑EDTA·2H₂O溶液缓慢倒入FeSO₄·7H₂O溶液中，使两种溶液充分混合，最后用蒸馏水定容到1 L，得到母液Ⅲ；（3）母液V的配制：按母液V的配方组成，将原料称好后，先用3ml蒸馏水溶解，再用蒸馏水定容至100 mL，得到母液V；（4）母液VI的配制：按母液VI的配方组成，将原料称好后，用100 ml蒸馏水溶解，再用蒸馏水定容至500 mL，得到母液VI；（5）配制培养基：分别量取母液Ⅰ50ml，母液Ⅱ、母液Ⅲ、母液Ⅳ各5ml，母液V 25ml母液VI 10ml放入烧杯中，再加入0.8g的琼脂粉，煮沸后调pH值至5.8‑6.0，高压灭菌，即得；其中马齿苋提取物是通过如下方法得到的：取干燥的马齿苋粉碎并过40目筛，再用15倍质量的体积分数为70%的乙醇浸提5个小时，浸提温度为100℃，然后将浸提液浓缩并烘干，得到粉末状固体，即为马齿苋提取物；其中南瓜粉是通过如下方法得到的：选择皮较硬、肉质呈桔红色的南瓜洗净、切块、去籽后自然风干或晒干；然后把南瓜粉碎成细粉状，过100目筛，把过筛后的粉末放入烘箱,温度调到80℃,烘干2小时即得南瓜粉。