发明名称 |
一种基于组织支架的三维视杯来源神经样细胞的钠离子通道检测方法 |
摘要 |
本发明公开了一种基于组织支架的三维视杯来源神经样细胞的钠离子通道检测方法。它是将人iPSc源性的3D视网膜的神经纤维层消化为单细胞,以该单细胞作为种子细胞经诱导分化培养基重悬后接入包被基质胶Matrigel的聚乳酸-羟基乙酸聚合物支架上,于诱导分化培养基中进行培养,所述的诱导分化培养基为含有神经营养因子和维持浓度的视网膜分化营养液组成的培养基;对培养到一定时期的聚乳酸-羟基乙酸聚合物支架上的神经样细胞进行钠离子通道检测,检测其神经基础功能。选择对PLGA膜片上培养的神经细胞进行钠离子通道免疫荧光染色,更加真实的反映组织膜片上细胞的状态,为进一步对膜片上细胞进行膜片钳检测功能电位提供依据及基础。 |
申请公布号 |
CN105445476A |
申请公布日期 |
2016.03.30 |
申请号 |
CN201510952749.0 |
申请日期 |
2015.12.17 |
申请人 |
中山大学中山眼科中心 |
发明人 |
葛坚;顾怀宇;钟秀风;李康寯;杨斯婧 |
分类号 |
G01N33/68(2006.01)I |
主分类号 |
G01N33/68(2006.01)I |
代理机构 |
广州科粤专利商标代理有限公司 44001 |
代理人 |
刘明星 |
主权项 |
一种基于组织支架的三维视杯来源神经样细胞的钠离子通道检测方法,其特征在于,包括以下步骤:将人iPSc源性的3D视网膜的神经纤维层消化为单细胞,以该单细胞作为种子细胞经诱导分化培养基重悬后接入包被基质胶Matrigel的聚乳酸‑羟基乙酸聚合物支架上,于诱导分化培养基中进行培养,所述的诱导分化培养基为含有神经营养因子和维持浓度的视网膜分化营养液组成的培养基;对培养到一定时期的聚乳酸‑羟基乙酸聚合物支架上的神经样细胞进行钠离子通道检测,检测其神经基础功能。 |
地址 |
510060 广东省广州市越秀区先烈南路54号中山大学中山眼科中心3号楼912室 |