| 摘要 |
Способ получения протеиназ из положительно заряженных белковых фракций в растущей популяции Escherichia coli, включающий консервацию клеток в присутствии забуференного 80-90% глицерина с последующим снятием клеточных оболочек 3% тритоном Х-100, экстракцию возрастающими концентрациями солей: 0,14 М, 0,35 М; 2 M NaCl, 6 M гуанидин гидрохлоридом с 0,1% β-меркаптоэтанолом, выделением из вышеперечисленных фракций положительно заряженных белков с помощью ионообменной хроматографии с амберлитом ИРЦ-50 в прерывистом градиенте гуанидин гидрохлорида: 6%, 8,9%, 10,6%, 13% на 0,1 M калий-фосфатном буфере рН 6,8, элюцией протеиназ с помощью метода аффинной хроматографии через колонку с сефарозой 4 В с иммобилизованным ингибитором трипсина с последующей оценкой протеолитической активности. |
