在动物细胞或动物组织中表达外源基因的方法

摘要

本发明公开了一种在动物细胞或动物组织中表达外源基因的方法。本发明提供了一种将外源基因导入哺乳动物细胞或组织中进行基因呈递的家蚕杆状病毒载体，包括骨架载体家蚕杆状病毒BmNPV以及重组到骨架载体上的外源基因的表达盒；所述外源基因的表达盒由哺乳动物启动子、外源基因和终止子组成。本发明进一步公开了一种在动物细胞或动物组织中表达外源基因的方法，包括：将构建的家蚕杆状病毒载体感染昆虫宿主或昆虫细胞；培养被感染的昆虫宿主或昆虫细胞对家蚕杆状病毒载体进行扩增；收获并纯化所扩增产物。本发明所构建的家蚕杆状病毒基因呈递载体在动物细胞中具有不可扩增、不会与动物细胞基因组进行重组、体外大量扩增方便、安全性高等优点。

主权项

一种将外源DNA序列在哺乳动物的组织中进行呈递的方法，包括：将含有外源DNA序列的家蚕杆状病毒载体感染哺乳动物；在哺乳动物组织中家蚕杆状病毒作为呈递载体对所带的外源DNA序列进行表达；所述的家蚕杆状病毒载体包括骨架载体以及重组到骨架载体上的外源DNA序列的表达盒；所述骨架载体是家蚕杆状病毒BmNPV DNA；所述外源DNA序列的表达盒由哺乳动物启动子、外源DNA序列和终止子组成；其构建方法包括：(1)将外源DNA序列的表达盒克隆到转移载体上，构建得到含有外源DNA序列的重组转移载体；(2)将所构建的含有外源DNA序列的重组转移载体与家蚕杆状病毒BmNPV DNA共转染家蚕细胞，进行同源重组，即得；所述的转移载体是pVL1393转移载体；所述的外源DNA序列的表达产物不具有诊断疾病或治疗疾病的功能。