一种乌羽玉无菌播种及再生体系建立的方法

摘要

本发明公开了一种乌羽玉无菌播种及再生体系建立的方法，具体操作步骤如下：1)培养基的配制，包括基本培养基和组培各阶段培养基的组分；2)种子消毒及接种；3)愈伤组织的诱导及分化；4)不定芽球的增殖；5)壮苗生根培养。本发明利用植物组织培养技术对乌羽玉进行无菌播种及再生快繁培养，能够在短时间内获得大量遗传性状一致的优质壮苗，克服了常规繁殖方法慢的缺点，对其种质资源收集及保存和规模化生产都具有积极意义。

主权项

一种乌羽玉无菌播种及再生体系建立的方法，其特征在于：包括如下步骤：1)、培养基的配制，培养基包括基本培养基和组培各阶段培养基的组分具体为：(1)基本培养基：MS或1/2MS，其中蔗糖20～30g/L，琼脂6～9g/L，pH＝5.8；(2)诱导培养基：MS+6‑BA 0.25～0.5mg/L+NAA0.01～0.05mg/L；(3)分化培养基：MS+6‑BA 0.01～0.05mg/L；(4)增殖培养基：MS+6‑BA 0.05～0.2mg/L+NAA0.01～0.05mg/L；(5)壮苗生根培养基：MS+6‑BA 0.01～0.05mg/L+NAA 0.1～0.3mg/L；2)种子的消毒及接种：以乌羽玉的种子为外植体材料，将消毒处理后的种子在无菌条件下接种于基本培养基上培养；3)愈伤组织的诱导及分化：将步骤2)萌发后的幼苗转移至诱导培养基上诱导愈伤组织形成并进行不定芽球的分化培养；4)不定芽的增殖：将步骤3)的不定芽球接种于增殖培养基上进行增殖培养；5)壮苗及生根培养：将步骤4)不定芽球分成单个后转至壮苗生根培养基上进行壮苗及生根培养。