一种利用搅拌式生物反应器生产传染性法氏囊病毒的方法

摘要

本发明提供了一种利用搅拌式生物反应器生产传染性法氏囊病毒的方法，该方法用生物反应器微载体细胞培养技术替代传统的转瓶培养，可解决生产效率低、产品质量不稳定、病毒效价低的问题。在此基础上，本发明结合传染性法氏囊病毒和DF1细胞的生物学特性，从微载体加入量、细胞接种密度、病毒接种量、病毒接种时细胞密度、收毒时间及反应器操作参数等角度匹配了适宜的条件，从而显著提升了病毒培养效率，单位培养效价提升10～100倍。此外，相对于转瓶培养，本发明的生物反应器方法培养规模大、参数控制全面，因此降低了受污染的系统性风险、提升了质量稳定性，应用前景广阔。

主权项

一种利用搅拌式生物反应器生产传染性法氏囊病毒的方法，其特征在于包括以下步骤：1)在搅拌式生物反应器内，将灭菌后的微载体以3～6g/L的用量与无菌细胞生长液混合，得到混合培养基，向其中接种DF1细胞的密度为0.6～1.2×10⁶个/mL，使DF1细胞在微载体上吸附培养，培养温度36～37℃、pH7.2～7.3、溶氧40～60％、搅拌速度30～80rpm；2)接种DF1细胞48～72h后，弃去混合培养基中的细胞生长液，加入细胞维持液，接入0.3～1.2MOI的传染性法氏囊病毒，继续培养；3)接种病毒24～48h后，收获病毒液。