用于检测HBV拉米夫定和/或阿德福韦耐药性的多重连接探针实时荧光PCR试剂盒

摘要

本发明属于生物技术领域，特别涉及用于检测慢性乙型肝炎耐药性的多重连接探针实时荧光PCR技术，所述多重连接探针实时荧光PCR试剂盒由MLPA探针组、填充序列和通用引物组成，所述探针分别是针对HBV的P基因逆转录区的rtM204V、rtM204I、rtA181T、rtA181V和rtN236T突变位点而设计的，探针的序列如SEQ ID NO:1-10所示；本发明还涉及运用该试剂盒检测HBV拉米夫定及阿德福韦耐药的方法，该方法结合了多重连接探针扩增(MLPA)技术的高通量和实时荧光PCR快速灵敏、实时检测的特点，与直接测序方法进行了比较，符合率高，而且能够检测出测序方法由于灵敏度不够而不能检测的样本；整个检测耗时4～5小时，为临床提供了一种成本低廉、检测快速的乙肝耐药检测方法。

主权项

用于检测HBV拉米夫定和/或阿德福韦耐药性的多重连接探针实时荧光PCR试剂盒，所述多重连接探针实时荧光PCR试剂盒由MLPA探针组、填充序列和通用引物组成，所述MLPA探针组分别是针对HBV的P基因逆转录区的rtM204V、rtM204I、rtA181T、rtA181V和rtN236T位点而设计的特异性序列；所述MLPA探针组共有5组，包括MLPA探针组Ⅰ、MLPA探针组Ⅱ、MLPA探针组Ⅲ、MLPA探针组Ⅳ和MLPA探针组Ⅴ；所述MLPA探针组Ⅰ分为如SEQ ID NO:1所示的5’探针和如SEQ ID NO:2所示的3’探针，所述MLPA探针组Ⅱ分为如SEQ ID NO:3所示的5’探针和如SEQ ID NO:4所示的3’探针，所述MLPA探针组Ⅲ分为如SEQ ID NO:5所示的5’探针和如SEQ ID NO:6所示的3’探针，所述MLPA探针组Ⅳ分为如SEQ ID NO:7所示的5’探针和如SEQ ID NO:8所示的3’探针，所述MLPA探针组Ⅴ分为如SEQ ID NO:9所示的5’探针和如SEQ ID NO:10所示的3’探针。