一种氧化寡糖交联胶原的方法

摘要

本发明涉及一种氧化寡糖交联胶原的方法，其方法是以含有一定量醛基的氧化寡糖为交联剂，在一定温度下与胶原分子或其聚集体进行交联反应，再经过清洗或透析处理，最后采用冷冻干燥机冻干，得到含有寡糖结构的交联胶原分子或其聚集体。通过该方法得到的交联胶原既保留了胶原的原有性能，同时引入了含有活性的寡糖结构，形成的交联结构能够耐受一定生物酶的降解作用，各项基本性能优良、生物相容性良好、兼具一定的功能性。该方法可用于生物材料与皮革工业中。

主权项

一种氧化寡糖交联胶原的方法，包括以下步骤：（1）预处理：称取100重量份的胶原（以干重计）；对于胶原纤维及其聚集体，将其浸泡于100～10000重量份的pH4.0至pH12.0的缓冲溶液中，充分湿润；对于提取得到的胶原分子，加入8000～100000重量份的pH3.0～6.5的醋酸溶液，振摇或搅拌使其完全溶解；（2）氧化寡糖溶液的制备：称取1～20重量份的氧化寡糖，溶于20～1000重量份的pH3.0～12.0的缓冲溶液中，搅拌或振摇至其完全溶解；（3）交联反应：将预处理后的胶原和氧化寡糖溶液加入反应容器中，并置于可控温的环境中，调整反应温度为0℃～45℃，保持振摇或搅拌，反应4～48小时；（4）后期处理：对于胶原纤维及其聚集体，用酸或硫酸铵、氯化铵将浴液pH调至中性，弃去浴液，加入100～10000重量份蒸馏水振摇或搅拌清洗0.5～2小时，弃去清洗液，继续清洗2～5次，取出清洗后的交联胶原，用冷冻干燥机冻干；对于提取得到的胶原分子，交联反应后，在0~4℃的环境中进行后续操作，首先用氢氧化钠溶液调节pH值为弱碱性（pH值约7.50），缓慢加入固体硫酸铵使其浓度约为1.5 mol/L，连续搅拌至硫酸铵完全溶解，然后静置过夜（10～12h）；次日用高速低温离心机离心分离（8000~12000 r/min，15 min），弃上清液，向沉淀中加入800‑10000重量份的0.5mol/L的醋酸溶液，搅拌30 min；将其注入透析袋（截留分子量为3500～14000Da）中，在0.04mol/L的磷酸氢二钠溶液或磷酸二氢钠溶液中透析1～2天，再置于0.02mol/L的磷酸氢二钠溶液或磷酸二氢钠溶液中透析1～2天，最后置于双蒸水或注射水中透析2天。