用于生成致密TALE-核酸酶的方法及其用途

摘要

本发明涉及一种用于生成可有效地靶向并加工双链DNA的致密转录激活物样效应物核酸酶（Transcription Activator-Like Effector Nuclease，TALEN）的方法。更具体地，本发明涉及一种用于产生TALEN的方法，所述TALEN由与至少一个催化结构域融合的单一TALE DNA结合结构域组成，使得活性实体由单一多肽链构成用于单一和有效载体化，并且不需要二聚化以靶向特定的目标单一双链DNA靶标序列和加工所述DNA靶标序列附近的DNA。本发明还涉及用于实施所述方法的致密TALEN、载体、组合物和试剂盒。

主权项

一种致密TALEN单体，其包含：(i)一个核心TALE支架，所述核心TALE支架包含对特定的目的双链DNA靶标序列具有DNA结合特异性的重复可变二肽区(RVD)；(ii)至少一个I‑Tevl的催化结构域，其当与来自(i)的所述核心TALE支架的C或N端融合时能够切割邻近所述目的双链DNA靶标序列的DNA；其中所述致密TALEN单体结合所述靶DNA序列并切割双链DNA。