发明名称 一种适合昆虫细胞Sf-9的无血清无动物源培养基
摘要 本发明涉及生物制药技术领域,具体涉及一种适合昆虫细胞Sf-9的无血清无动物源培养基的制备。本发明针对昆虫细胞Sf-9细胞的生长的特点,研制适合Sf-9细胞高密度悬浮培养的低成本、无血清、无动物源、低蛋白培养基。通过添加脂类、维生素、微量元素、重组蛋白和水解物等组分来替代血清的生物学功能,避免了血清对后期纯化和抗原的分离带来的一些负面作用。通过对培养基组分的优化,使Sf-9细胞在悬浮培养中增殖速度更快,细胞密度更高,细胞活力更强,更适合于规模化工业生产。
申请公布号 CN105255810A 申请公布日期 2016.01.20
申请号 CN201510759605.3 申请日期 2015.11.09
申请人 内蒙古金源康生物工程有限公司 发明人 赵峻岭;苏广华;黄新朋
分类号 C12N5/07(2010.01)I 主分类号 C12N5/07(2010.01)I
代理机构 代理人
主权项 一种适合悬浮培养昆虫细胞的无血清、无动物源培养基,其特征在于,所述培养基中包括下列含量的原料物质:(1)氨基酸部分:L‑丙氨酸100‑500mg/L,L‑谷氨酰胺900‑5500mg/L,L‑精氨酸盐酸盐700‑2500mg/L,L‑天冬氨酸900‑1700mg/L,L‑天冬酰胺800‑1800mg/L,L‑半胱氨酸一水合物120‑320mg/L,L‑谷氨酸1300‑2800mg/L,L‑异亮氨酸400‑1300mg/L,L‑亮氨酸300‑750mg/L,L‑赖氨酸盐酸盐400‑1600mg/L,L‑蛋氨酸600‑1650mg/L,L‑苯丙氨酸700‑1800mg/L,L‑脯氨酸300‑1000mg/L,L‑丝氨酸200‑1050mg/L,L‑苏氨酸200‑900mg/L,L‑色氨酸100‑400mg/L,L‑酪氨酸二钠盐200‑900mg/L,L‑缬氨酸300‑980mg/L,L‑胱氨酸盐酸盐50‑85mg/L,L‑组氨酸盐酸盐100‑250mg/L,L‑赖氨酸300‑1000mg/L,甘氨酸200‑900mg/L;(2)无机盐部分:四水钼酸铵0.01‑2mg/L,无水氯化钙100‑950mg/L,氯化钠1000‑7500mg/L,磷酸氢二钠10‑45mg/L,六水氯化镁500‑800mg/L,无水硫酸镁200‑900mg/L,氯化钾400‑2350mg/L,一水磷酸二氢钠800‑1500mg/L,七水合硫酸锌0.1‑0.7mg/L,亚硒酸钠0.01‑0.03mg/L,硫酸亚铁0.01‑0.2mg/L,碳酸氢钠100‑900mg/L;(3)维生素部分:生物素0.005‑0.01mg/L,维生素B12 0.1‑0.8mg/L,氯化胆碱0.5‑5mg/L,D‑泛酸钙0.2‑2mg/L,叶酸0.2‑5mg/L,烟酰胺5‑8mg/L,盐酸吡哆醇5‑8mg/L,磷酸吡哆醛0.06‑0.3mg/L,核黄素0.08‑0.6mg/L,钻胺素0.04‑3mg/L,盐酸硫胺素0.05‑0.5mg/L,肌醇5‑8mg/L;(4)脂类添加部分:亚油酸0.1‑0.3mg/L,大豆卵磷脂15‑20mg/L,胆固醇20‑60mg/L,腐胺0.04‑0.8mg/L,乙醇胺5‑40mg/L,无水乙醇0.5‑2ml/L;(5)水解物添加部分:大豆水解物500‑4000mg/L,酵母超滤物500‑4000mg/L,大米水解物500‑2000mg/L,(6)其余添加物部分:D‑葡萄糖3000‑6000mg/L,丙酮酸钠100‑250mg/L,硫辛酸0.05‑0.6mg/L,胸苷0.06‑0.5mg/L,腺嘌呤0.1‑5mg/L,胸腺嘧啶0.02‑2mg/L,重组胰岛素3‑25mg/L,柠檬酸铁0.02‑1mg/L,环庚三烯酚酮0.1‑8mg/L,F‑68 50‑600mg/L,还原型谷胱甘肽0.01‑0.9mg/L,次黄嘌呤钠盐0.1‑5mg/L。
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