羊草Na<SUP>+</SUP>/H<SUP>+</SUP>反向转运蛋白基因序列及其克隆和应用

摘要

本发明公开了羊草Na⁺/H⁺反向转运蛋白的基因序列及其克隆和应用。属于分子生物学领域。根据其它植物中发表的Na⁺/H⁺反向转运蛋白的氨基酸序列，设计引物，利用反转录－聚合酶链式反应，从羊草中首次分离出编码液泡型Na⁺/H⁺反向转运蛋白的基因。将该基因转入盐敏感酵母突变体，能在一定程度上恢复其抗盐能力。进一步构建正义表达载体，转化烟草，转基因植株具有较高的耐盐性，耐盐性可达200mM。该基因可用于植物的遗传转化，提高植物的耐盐能力。

主权项

1.一个克隆的羊草Na+/H+反向转运蛋白基因，其特征在于它具有如下所示的核苷酸序列：ATGGGGTTCGAAATAGTGACGGCGCAGCTGGCGCGGCTGAGCGGCGCGCTGGGCACCTCG----60GACCACGCGTCCGTGGTCTCCATCAACCTCTTCGTGGCGCTGCTCTGCGCCTGCATCGTC---120CTCGGCCACCTCCTCGAGGAGAACCGCTGGCTCAACGAGTCCATCACCGCCCTCATCATC---180GGGCTGTGCACGGGCGTGGTGATCCTGCTGACCACCAAGGGGAAGAGCTCGCACGTGCTC---240GTCTTCAGCGAGGACCTCTTCTTCATATACCTCCTCCCTCCCATCATCTTCAACGCCGGT---300TTCCAGGTGAAGAAGAAGCAGTTCTTCCGGAATTTCATGACAATCACACTATTTGGTGCT---360GTTGGGACGATGATTTCGTTTTTCACAATATCTCTTGCTGCCATTGCGATATTCAGCAAG---420ATGAACATTGGGACACTGGACGTATCAGATTTTCTTGCAATTGGAGCTATCTTTTCCGCG---480ACAGATTCCGTCTGCACTTTACAGGTTCTGAATCAGGATGAGACGCCCTTTTTGTACAGT---540CTAGTTTTCGGGGAAGGTGTTGTGAACGACGCCACATCAGTCGCGCTTTTCAACGCGCTC---600CAGAACCTTGATCCTAACCACATCGACGCAATCGTCATTCTCAAGTTCTTGGGGAATTTC---660TGCTACTTATTCGTGTCAAGCACCTTCCTTGGAGTGTTTTCTGGATTGCTCAGTGCATAC---720ATAATCAAGAAGTTATACATAGGAAGGCATTCTACTGACCGTGAGGTTGCACTTATGATG---780CTCATGGCCTACCTCTCATATATGCTAGCTGAGCTGCTTGATTTGAGTGGCATCCTCACT---840GTATTCTTCTGTGGTATTGTGATGTCACATTATACCTGGCATAACGTGACAGTGAGCTCA---900AGAGTTACAACAAAGCATGCGTTCGCAACCTTGTCCTTCATCGCTGAGACTTTTCTCTTC---960CTTTATGTTGGGATGGATGCACTGGATATTGAGAAATGGAAATTTGCTAGTGACAGCCCT--1020GGCAAATCCATTGGAATAAGCTCAATTTTGCTAGGGTTGGTTCTGGTGGGAAGAGCTGCT--1080TTTGTCTTCCCGCTCTCATTCTTGTCCAACTTAACAAAGAAGACGGCTCTCGAGAAAATA--1140AGCTGGAGGCAGCAAGTCGTAATATGGTGGGCCGGGCTGATGAGAGGAGCTGTGTCGATT--1200GCTCTTGCTTACAATAAGTTTACAAGATCTGGTCACACGCAGCTGCACGGCAACGCGATA--1260ATGATCACCAGCACCATCACTGTCGTTCTGTTTAGCACCATGCTGTTTGGCATATTGACA--1320AAGCCTCTGATCCGGTTCCTGCTGCCCGCGTCGAGTGGCGCCACCTCGGAGCCCTCATCA--1380CCGAAGTCCCTGCACTCTCCTCTCCTCACAAGCATGCTAGGCTCGGACCTGGAGCCGGCT--1440CTCCCCATCGTCAGGCCGTCCAGCCTCCGGATGCTCCTCACCAAGCCGACCCACACCGTC--1500CACTACTACTGGCGCAAGTTTGACGACGCGCTGATGCGCCCGATGTTCGGTGGGCGCGGG--1560TTCGTGCCCTACTCCCCAGGATCACCCACCGATCCGAATGTACACGTGGGATGAACGTCG--1620CGAAGAAACAACGCAGAAGCCATTACGGCTTCAGAAGGCACTTGAACCGTGACATGAAGA--1680GAAGGAATCACTACAGCTTCAGAAGAAGGCAAAGTTTCCGGTAATATTATAGTGTTTGGC--1740TAACTCAGAAGGCCGACGGCCCTCTGATGATGGTTCAGATGAACGGTTGGTTGCGGCACC--1800AACAGGAAGATGAACCCTAGTAACGGTGATGCGAGTATCATCGCCTTATAGGTTACGACG--1860AGCCTGTACATTTTTGTATGTAGATTAACAAGCCATTGTATCCTATGAGATCTCCGCTAG--1920CAGGCAGGTGTCTGACCTCCTGCGTCTACCCTTACTTAATCTCCTAATGGATTGGTGTGT--1980ATCCTGCCAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA--------------------2022