用于制备包含TNFα和载体蛋白质的抗原杂络物的稳定的免疫原产品的方法

摘要

本发明涉及TNFα和载体蛋白质的抗原杂络物，其用于在哺乳动物中获得体液免疫应答，产生中和TNFα的生物活性的抗体，还涉及其制备方法。该抗原蛋白质TNFα和载体蛋白质在EDTA存在下结合，使用戊二醛、甲醛和甘氨酸以及，在某些实施方案中使用DMSO，从而提高其免疫原性和稳定性。可以使用下列蛋白质作为载体：匙孔槭血蓝素(KLH)、牛血清白蛋白(BSA)、灭活的细菌毒素例如破伤风毒素或白喉类毒素(TT和DT)、结核菌素的纯化的蛋白质衍生物(PPD)和来自流感嗜血杆菌的蛋白质D。

主权项

1.用于制备抗-TNFα免疫原产品的方法，包括步骤：a)提供含有TNFα的溶液；b)向步骤a)的含有TNFα的溶液中加入EDTA；c)向在步骤b)结束时获得的溶液中加入载体蛋白质；d)向在步骤c)结束时获得的液体混合物中加入戊二醛；e)从在步骤d)结束时获得的溶液中除去戊二醛以及TNFα和所述载体蛋白质的游离分子；f)向在步骤e)结束时获得的溶液中加入甲醛，并在96小时至192小时时间范围内维持甲醛的存在；g)向在步骤f)结束时获得的溶液中加入阻断与甲醛反应的试剂；以及h)从在步骤h)结束时获得的溶液中除去甲醛和阻断试剂，从而获得含有上述抗-TNFα免疫原产品的溶液。