一种口蹄疫病毒样颗粒疫苗及其制备方法

摘要

本发明公开了一种口蹄疫病毒样颗粒疫苗及其制备方法。本发明首先通过表达P12A(3个氨基酸位点突变，VP1K210E、VP1E83K、VP1C134S)和无血清悬浮培养，建立类似自然的75S FMDV病毒样颗粒(VLP)标准，并提高了病毒样颗粒的产量。本发明进一步提供了一种无血清悬浮培养、高pH驯化昆虫细胞，该昆虫细胞可稳定、高效生产FMDV VLP，生产的VLP大小和结构类似标准BHK-21上生产的VLP，产量高出母本细胞Sf21的11倍。VLP制备疫苗免疫动物产生IgG抗体反应。IgG抗体滴度、口蹄疫病毒中和抗体滴度和BHK-21制备的VLP疫苗免疫所产生的无显著差异。这表明这种高pH适应昆虫细胞可用于FMDV VLP的疫苗生产。

主权项

一种口蹄疫病毒样颗粒疫苗，其特征在于，通过以下方法制备得到：将口蹄疫病毒衣壳前体蛋白P12A cDNA序列克隆到真核表达载体中，所得的重组质粒转染哺乳动物细胞，使其表达口蹄疫病毒衣壳蛋白并组装成口蹄疫病毒样颗粒，纯化、乳化，即得；其中，所述的衣壳前体蛋白P12A的结构蛋白VP1在原始口蹄疫病毒VP1蛋白基因的基础上进行了以下位点的突变：Glu83→Lys，Ser134→Cys，P12A连接处Lys210→Glu。