利用枯草芽孢杆菌液体发酵制备β-半乳糖苷酶酶制剂的方法

摘要

本发明涉及一种利用枯草芽孢杆菌液体发酵制备β-半乳糖苷酶酶制剂的方法，其特征在于选用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) F69作为β-半乳糖苷酶的生产菌种，先经摇瓶震荡法发酵制备发酵液或者发酵罐通风发酵法制备发酵液、再经β-半乳糖苷酶酶制剂制备，而得到β-半乳糖苷酶酶制剂成品。本发明生产的β-半乳糖苷酶耐热性好，即80℃保温60min、残余酶活达85％；酶活性高，即发酵液酶活达216U/ml；酶回收率高，即总酶活回收率大于80%、酶冻干粉酶活力单位达到2512U/g；且操作工艺简单、生产效率高和生产成本低，适合于大批量生产。

主权项

一种利用枯草芽孢杆菌液体发酵制备β‑半乳糖苷酶酶制剂的方法，其特征在于选用属于微生物类群的保藏号为CGMCC No.5699的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)F69作为β‑半乳糖苷酶的生产菌种，先经摇瓶震荡法发酵制备发酵液或者发酵罐通风发酵法制备发酵液、再经β‑半乳糖苷酶酶制剂制备，而得到β‑半乳糖苷酶酶制剂成品，具体步骤如下：所述的摇瓶震荡法发酵制备发酵液：包括⑴菌种活化、⑵种子液制备和⑶摇瓶液体发酵；所述的发酵罐通风发酵法制备发酵液：包括⑴菌种活化、⑵一级种子液制备、⑶二级种子液制备和⑷发酵罐气升式发酵；所述的β‑半乳糖苷酶酶制剂制备：包括⑴发酵液分段超滤、⑵发酵液硫酸铵盐析、⑶透析、⑷超滤浓缩、⑸添加保护剂、⑹粗酶冷冻干燥和⑺固体粗酶粉碎。