一种酶促制备(S)-3-羟基-4-氯丁酸乙酯的方法

摘要

本发明涉及一种酶促制备(S)-3-羟基-4-氯丁酸乙酯的方法，其以4-氯乙酰乙酸乙酯为底物，使该底物在酮还原酶的存在下发生不对称还原反应生成(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯，特别是，所述的酮还原酶为胞内酶，且为整细胞酶，且使反应在pH6.5～7.5的水相缓冲液中以及温度35～38℃下进行，其中不使用辅酶因子、不添加有机溶剂。本发明方法与已有的生物制备方法相比，无需使用昂贵的辅酶因子，也无需使用有机溶剂，成本更低，操作更简单，且底物转化率高，产品收率高，因而本发明方法更适于工业化生产。

主权项

一种酶促制备(S)‑3‑羟基‑4‑氯丁酸乙酯的方法，其以4‑氯乙酰乙酸乙酯为底物，使该底物在酮还原酶的存在下发生不对称还原反应生成(S)‑4‑氯‑3‑羟基丁酸乙酯，其特征在于：所述的酮还原酶为胞内酶，且为整细胞酶，且使所述反应在pH 6.5～7.5的水相缓冲液中以及温度35～38℃下进行，其中不使用辅酶因子、不添加有机溶剂，所述的酮还原酶为酶活在60U/ml～70U/ml之间的Cell KRED‑022酶液，所述方法还使所述反应在一价或二价金属离子存在下进行，所述的金属离子为Li⁺、Na⁺、Mg²⁺、Ca²⁺、Cu²⁺、Zn²⁺、Mn²⁺中的一种或多种的组合。