离子强度介导的pH梯度离子交换色谱

摘要

本发明提供了用于通过离子强度介导的pH梯度离子交换色谱来分析多肽如抗体组合物的方法。在一些方面，所述方法使用pH梯度与离子强度梯度的组合来从多肽的电荷变体分离多肽。在一些方面，所述方法使用稳定的离子强度来优化pH梯度分离窗从而从电荷变体分离多肽。这样的方法可用于分析pI大于9或pI小于7的多肽如抗体。在一些方面，本发明提供了用于分析具有多种pI的多肽的多产物方法。

主权项

用于分析包含多肽以及一种或多种污染物的组合物的方法，所述方法包括a)使用加样缓冲剂、使所述多肽以及一种或多种污染物结合至离子交换色谱材料，其中所述加样缓冲剂处于第一pH，且包含第一离子强度；b)使用洗脱缓冲剂从所述离子交换色谱材料洗脱所述多肽以及一种或多种污染物，其中所述洗脱缓冲剂的pH在pH梯度中改变，且所述洗脱缓冲剂的离子强度在离子强度梯度中改变，其中通过所述pH梯度和离子强度梯度的组合来分离所述多肽以及所述一种或多种污染物；以及c)检测所述多肽和所述一种或多种污染物。