一种产胆盐水解酶的基因工程菌及其构建方法与应用

摘要

本发明公开了一种产胆盐水解酶的基因工程菌及其构建方法与应用，属于基因工程技术领域。本发明采用重组DNA技术将双歧杆菌Bifidobacterium infantis KL412的胆盐水解酶(bsh)基因克隆连接到大肠杆菌表达载体pET-22b(+)，并转化Escherichia coli BL21(DE3)，经筛选鉴定得到一株可以产较高活性胆盐水解酶的重组大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)-pET-22b(+)-bsh。种子液以2％转接发酵培养基，重组菌在20℃、OD₆₀₀2.0、IPTG1mmol/L条件下诱导32h可达最高酶活，对甘氨脱氧胆酸钠(GDCA)和牛磺酸脱氧胆酸钠(TDCA)的酶活分别为135.2和121.3U/mL。这为胆盐水解酶的大规模生产及其作为功能食品来降低血清胆固醇奠定了良好的基础。

主权项

一种产胆盐水解酶的大肠杆菌基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌表达氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的胆盐水解酶。