从白刺种子中分离纯化一种手性生物碱rsMTCA的方法

摘要

本发明提供了从白刺种子中分离纯化(1R，3S)-1-甲基-1，2，3，4-四氢-β-咔啉-3-羧基酸(rsMTCA)的方法。本发明利用高速逆流色谱并采用了合理的溶剂体系从白刺中获得高纯度的rsMTCA，该技术不需要使用固相载体，无不可逆吸附，样品无损失、无污染、高效、快速、低成本分离制备(1R，3S)-1-甲基-1，2，3，4-四氢-β-咔啉-3-羧基酸。本发明工艺简单、操作方便、安全、重复性好，可工业化生产。

主权项

从白刺种子中分离纯化(1R，3S)‑1‑甲基‑1，2，3，4‑四氢‑β‑咔啉‑3‑羧基酸的方法，其特征在于：它包括如下操作步骤：(1)粗提物的制备：取白刺种子，以乙醇为溶剂进行提取，提取液回收乙醇至无醇味，加入石油醚进行萃取，取水层，上大孔吸附树脂柱，依次用水、10％V/V乙醇溶液洗脱，收集10％V/V乙醇洗脱液，浓缩、干燥即得粗提物；(2)采用高速逆流色谱法分离：取正丁醇∶0.5％甲酸＝5∶6V/V，置于分液漏斗中配制两相溶剂系统，取上相为固定相，下相为流动相；取粗提物，溶解于适量固定相和流动相的混合液中，得到样品溶液；以20～40mL/min的流速将固定相泵入主机并充满分离螺线管，保持温度25～30℃，主机正向旋转，转速为800～1000r/min，以1.5～3.0mL/min的速度泵入流动相，待流动相从管柱口流出且基线稳定后，注入样品溶液，在254～280mm波长下进行检测，收集出峰时间300～350min的成分，即得初步纯化物；(3)半制备液相色谱分离：取初步纯化物，上半制备液相色谱，在254～280nm下检测，收集第二大色谱峰洗脱部位，除去溶剂即可得到(1R，3S)‑1‑甲基‑1，2，3，4‑四氢‑β‑咔啉‑3‑羧基酸，色谱条件如下：流动相∶甲醇‑水＝(25～30)∶(75～70)。