发明名称 一种重组质粒及其在降解纤维素原料中的应用
摘要 本发明涉及一种重组质粒及其在降解纤维素原料中的应用。利用NotI酶将pUG6质粒切成线性质粒,然后将PCR扩增获得的里氏木霉木聚糖解酶II启动子(XYN2upstream)、β-葡萄糖苷酶的编码基因(Glucosidase)以及终止子(Terminator)、潮霉素磷酸转移酶的编码基因片段(HPH)和里氏木霉木聚糖解酶II终止子(XYN2downstream)依次与上述线性质粒连接,制得重组质粒PUG6-XYN2-GLU-HPH。本发明首次构建了能够表达高酶活的beta-葡萄糖苷酶的重组质粒,该重组质粒表达的高酶活beta-葡萄糖苷酶能够改善纤维素酶降解木质纤维素的效率。
申请公布号 CN104975039A 申请公布日期 2015.10.14
申请号 CN201510354619.7 申请日期 2015.06.24
申请人 方诩;王海鹏 发明人 方诩;王海鹏
分类号 C12N15/80(2006.01)I;C12N1/15(2006.01)I;C12N9/42(2006.01)I;C12P19/14(2006.01)I;C12P7/10(2006.01)I;C12R1/885(2006.01)N 主分类号 C12N15/80(2006.01)I
代理机构 济南金迪知识产权代理有限公司 37219 代理人 朱家富
主权项 一种重组质粒PUG6‑XYN2‑GLU‑HPH,其特征在于,利用NotI酶将pUG6质粒切成线性质粒,然后将PCR扩增获得的里氏木霉木聚糖解酶II启动子(XYN2upstream)、β‑葡萄糖苷酶的编码基因(Glucosidase)以及终止子(Terminator)、潮霉素磷酸转移酶的编码基因片段(HPH)和里氏木霉木聚糖解酶II终止子(XYN2downstream)依次与上述线性质粒连接,制得重组质粒PUG6‑XYN2‑GLU‑HPH;所述β‑葡萄糖苷酶的编码基因核苷酸序列(Glucosidase)如SEQ ID NO.1所示,其终止子(Terminator)如SEQ ID NO.5所示;里氏木霉木聚糖解酶II启动子的核苷酸序列(XYN2upstream)如SEQ ID NO.2所示;里氏木霉木聚糖解酶II终止子的核苷酸序列(XYN2downstream)如SEQ ID NO.3所示;潮霉素磷酸转移酶的编码基因的核苷酸序列(HPH)如SEQ ID NO.4所示。
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