荧光示踪多功能脱色的脱色希瓦氏工程菌及其构建方法

摘要

本发明公开了一种荧光示踪多功能脱色的脱色希瓦氏工程菌及其构建方法，旨在提供一种对偶氮、蒽醌和三苯基甲烷三大类染料都具有高效脱色能力，并且具有荧光示踪功能的基因工程菌。本发明的技术方案是将外源融合基因SPrtpmD’整合进入脱色希瓦氏菌S12，所述的融合基因SPrtpmD’是在脱色希瓦氏菌S12的NAD(P)H脱氢酶基因启动子序列之后连接三苯基甲烷染料脱色酶修饰基因tpmD’构成，所述的三苯基甲烷染料脱色酶修饰基因tpmD’，是在三苯基甲烷染料脱色酶基因tpmD的5’端起始密码子前加有SD序列，在3’端终止密码子之前加有能螯合双砷荧光染料的编码6个氨基酸的小标签。本发明用于环境修复和治理中。

主权项

1. 一种荧光示踪多功能脱色的脱色希瓦氏工程菌，其特征在于所述的工程菌是将外源基因整合进入染色体中，所述的外源基因是融合基因SPrtpmD’，所述的融合基因SPrtpmD’是在脱色希瓦氏菌S12的NAD(P)H脱氢酶基因启动子序列SPr之后连接三苯基甲烷染料脱色酶修饰基因tpmD’构成，所述的三苯基甲烷染料脱色酶修饰基因tpmD’，是在三苯基甲烷染料脱色酶基因tpmD的5’端起始密码子ATG前加有SD序列，在3’端终止密码子之前加有能螯合双砷荧光染料的编码6个氨基酸(CCPGCC)的小标签，所述的tpmD序列如SEQ1所示，所述的NAD(P)H脱氢酶基因启动子序列如SEQ2所示，所述的SD序列如SEQ7所示，所述的螯合双砷荧光染料编码CCPGCC六个氨基酸的碱基序列如SEQ6所示，所述的工程菌能分泌能螯合双砷荧光染料的三苯基甲烷染料脱色酶。