提高耐辐射奇球菌类胡萝卜素产量的方法

摘要

本发明提供一种提高耐辐射奇球菌类胡萝卜素产量的方法，是将发酵培养到稳定早期的耐辐射奇球菌通过光照诱导处理和后培养，诱导菌体类胡萝卜素大量合成，以提高其产量。本发明的菌体经过离心分离，低温有机溶剂提取，所获得的类胡萝卜素产量比未经光照处理的提高了25％以上。本发明方法设计合理，条件温和、操作简便，可用于有效提高发酵法生产类胡萝卜素的产量。

主权项

1、一种提高耐辐射奇球菌类胡萝卜素产量的方法，所用的菌株为耐辐射奇球菌(Deinococcus radiodurans)，来源于美国典型物保藏中心，保藏号：ATCCNo.13939，其特征是通过以下步骤实现：(1)菌种的活化：将耐辐射奇球菌划线接种于TGY固体培养基上，培养基组成为蛋白胨5g/L，酵母提取物3g/L，葡萄糖1g/L，30±1℃培养40～45小时，挑取单菌落接种于三角瓶中摇瓶培养至对数生长期早期；(2)发酵培养条件：将步骤(1)的种子液按2％体积的接种量接入发酵液体培养基中，28～32℃培养38～42小时；(3)光照诱导条件：①菌体光照诱导时期的选择：菌体生长到38～42小时，菌浓度＞108ml-1，菌体形态多数呈二联体；②诱导方法：将菌体培养物置于带光源的培养室内光照处理30～60分钟；(4)菌体光照后培养的条件：经光照诱导后的菌体，在30～32℃条件下培养60分钟，使菌体在接受光照刺激后，大量合成耐辐射奇球菌类胡萝卜素；(5)耐辐射奇球菌类胡萝卜素的提取：①菌液离心5000rpm，4℃，10分钟，收集菌体细胞沉淀，用50～60mM，pH7.0的磷酸盐缓冲液洗涤三次，离心收集菌体细胞；②每克湿菌体加入1～3倍低温预冷的提取液，冰上振荡30分钟，8000rpm，3～4℃条件下离心10～20分钟，收集上清液，重复提取三次并将提取液混合，即为耐辐射奇球菌类胡萝卜素提取液。