一种载脂蛋白A-I的制备方法

摘要

本发明属生化药物制药领域，涉及载脂蛋白A-I的制备方法，具体涉及一种从废弃的人血浆F-IV组分分离制备载脂蛋白A-I(ApoA-I)的方法。本发明利用废弃人血浆F-IV组分经等电点沉淀、氯仿、乙醇处理获得纯度98％和按血浆F-IV ApoA-I含量计算收率高达23.5％，并保持天然ApoA-I生物活性的载脂蛋白A-I，每克湿重F-IV可制备3.1mg纯化ApoA-I，本发明为开发ApoA-I药用价值奠定了良好基础。提供了一种适合工业化生产的人血浆ApoA-I制备方法。

主权项

一种载脂蛋白A I的制备方法，其特征是包括下述步骤：①采用废弃的血浆F IV组分30g为原料，采用pH7.3的含65％乙醇 10mM NaHCO3液于 20℃搅拌抽提，离心取上清液，②上清液调pH5.5，离心收集沉淀， 4℃溶解于pH8.6的50mL100mMTris HCl 6M Urea溶液，③加等体积1∶1氯仿/乙醇液脱脂， 20℃静置，离心取上层液，④加等体积乙醇沉淀， 20℃静置，离心取上清液，⑤浓缩，经20mM碳酸盐缓冲液透析，⑥巴氏灭菌，除菌过滤，⑦冻干，得ApoA I干粉。