主权项 |
一种监别棉蚜(i>Aphis gossypii/i>)、马铃薯蚜(i>Aulacorthum solani/i>)、伪菜蚜(i>Lipaphis erysimi/i>)、小桔蚜(i>Toxoptera aurantii/i>)之方法,包含:(a)萃取待测虫体之去氧核醣核酸(DNA);(b)以SEQ ID NO:17及SEQ ID NO:18增幅待测虫体之粒线体细胞色素氧化酶I基因(COI)片段序列,增幅出之序列为SEQ ID NO:13-16;(c)使用寡核苷酸探针与步骤(b)之产物进行杂合反应,其中该寡核苷酸探针为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12所示之核苷酸序列;以及(d)监定步骤(c)之杂合反应结果。如申请专利范围第1项所述监别棉蚜(i>Aphis gossypii/i>)、马铃薯蚜(i>Aulacorthum solani/i>)、伪菜蚜(i>Lipaphis erysimi/i>)、小桔蚜(i>Toxoptera aurantii/i>)之方法,其中该步骤(b)为使用聚合酶连锁反应进行增幅。如申请专利范围第1项所述监别棉蚜(i>Aphis gossypii/i>)、马铃薯蚜(i>Aulacorthum solani/i>)、伪菜蚜(i>Lipaphis erysimi/i>)、小桔蚜(i>Toxoptera aurantii/i>)之方法,更包含使用标记分子标记该步骤(b)之产物。如申请专利范围第3项所述监别棉蚜(i>Aphis gossypii/i>)、马铃薯蚜(i>Aulacorthum solani/i>)、伪菜蚜(i>Lipaphis erysimi/i>)、小桔蚜(i>Toxoptera aurantii/i>)、之方法,其中该标记分子标记为生物素(Biotin)。一种用于监别棉蚜(i>Aphis gossypii/i>)、马铃薯蚜(i>Aulacorthum solani/i>)、伪菜蚜(i>Lipaphis erysimi/i>)、小桔蚜(i>Toxoptera aurantii/i>)之生物晶片,包含一基材;复数寡核苷酸探针,固着于该基材上,该些寡核苷酸探针为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12所示之核苷酸序列。如申请专利范围第5项所述用于监别棉蚜(i>Aphis gossypii/i>)、马铃薯蚜(i>Aulacorthum solani/i>)、伪菜蚜(i>Lipaphis erysimi/i>)、小桔蚜(i>Toxoptera aurantii/i>)之生物晶片,其中该基材之材质包含尼龙膜、高分子材料、矽片或玻璃。一种利用申请专利范围第5项所述之生物晶片监别棉蚜(i>Aphis gossypii/i>)、马铃薯蚜(i>Aulacorthum solani/i>)、伪菜蚜(i>Lipaphis erysimi/i>)、小桔蚜(i>Toxoptera aurantii/i>)之方法,包含:(a)萃取待测虫体之去氧核醣核酸(DNA);(b)以SEQ ID NO:17及SEQ ID NO:18增幅待测虫体之粒线体细胞色素氧化酶I基因(COI)片段序列,增幅出之序列为SEQ ID NO:13-16;(c)使用申请专利范围第5项所述之生物晶片进行杂合反应;以及(d)监定步骤(c)之杂合反应结果。如申请专利范围第7项所述利用申请专利范围第5项所述之生物晶片监别棉蚜(i>Aphis gossypii/i>)、马铃薯蚜(i>Aulacorthum solani/i>)、伪菜蚜(i>Lipaphis erysimi/i>)、小桔蚜(i>Toxoptera aurantii/i>)之方法,其中该步骤(b)为使用聚合酶连锁反应进行增幅。如申请专利范围第7项所述利用申请专利范围第5项所述之生物晶片监别棉蚜(i>Aphis gossypii/i>)、马铃薯蚜(i>Aulacorthum solani/i>)、伪菜蚜(i>Lipaphis erysimi/i>)、小桔蚜(i>Toxoptera aurantii/i>)之方法,更包含使用标记分子标记该步骤(b)之产物。如申请专利范围第9项所述利用申请专利范围第5项所述之生物晶片监别棉蚜(i>Aphis gossypii/i>)、马铃薯蚜(i>Aulacorthum solani/i>)、伪菜蚜(i>Lipaphis erysimi/i>)、小桔蚜(i>Toxoptera aurantii/i>)之方法,其中该标记分子为生物素(Biotin)。一种监别棉蚜(i>Aphis gossypii/i>)、马铃薯蚜(i>Aulacorthum solani/i>)、伪菜蚜(i>Lipaphis erysimi/i>)、小桔蚜(i>Toxoptera aurantii/i>)之套组,包含:五种寡核苷酸探针,该五种寡核苷酸探针包含SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4之至少其中之一、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6之至少其中之一、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8之至少其中之一、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12之至少其中之一所示之核苷酸序列;以及一COI基因专一性引子对,具有SEQ ID NO:17及SEQ ID NO:18所示之序列。 |