一种从水蛭唾液中提取水蛭素的方法

摘要

本发明公开一种从水蛭唾液中提取水蛭素的方法，包括以下步骤：A、将水蛭置于容器中充分饥饿，投入诱导物质至水蛭吸饱后，加入催吐剂使其吐出体内的唾液，然后取出吸血水蛭活体返回饲养池继续饲养，同时收集容器内的水蛭素粗品液体；B、解冻上述水蛭素粗品，加进预冷的冷丙酮中，搅拌后置冰箱中沉淀过夜，次日吸出上清丙酮并离心，加入三氯乙酸溶解，离心除去残渣，得浓缩液；C、用阴离子交换柱层析法对上述浓缩液进行洗脱后，进行凝胶过滤柱层析，即得。本发明提供一种具有工艺合理、操作方便实用、水蛭素成品的质量稳定性好和收率较高的特点，且能够避免传统方法对水蛭的一次性掠夺，保护了水蛭的野生资源，又带动了水蛭养殖业的发展。

主权项

一种从水蛭唾液中提取水蛭素的方法，其特征在于，包括以下步骤：A、将水蛭置于容器中充分饥饿，投入诱导物质至水蛭吸饱后，加入催吐剂使其吐出体内的唾液即天然水蛭素粗品液体，然后取出吸血水蛭活体并将其冲洗干净后返回饲养池继续饲养；同时收集容器内的水蛭素粗品液体，置冰箱中冷冻保存待用；所述的诱导物质由蚯蚓提取液10～300ml、壳聚糖5～50g、黄芪多糖1～20g、葡萄糖粉1～30g组成；所述的催吐剂为硫酸锌与乙醇的混合液，其比例为1:1～2，催吐剂的用量与水蛭活体之间的重量比为1:1～10；B、解冻上述水蛭素粗品，取250~300ml加进4倍置冰箱中4℃下预冷的含15%水的冷丙酮中，搅拌后置冰箱中4℃下让其沉淀过夜，次日吸出上清丙酮并离心，在所得沉淀中加入预冷的三氯乙酸20‑30ml使其溶解，离心除去残渣，得唾液腺分泌物浓缩液；C、用阴离子交换柱层析法对上述唾液腺分泌物浓缩液进行洗脱后，进行凝胶过滤柱层析，即得。