一种用制备液相法同时得到多种淫羊藿黄酮的分离方法

摘要

本发明公开了一种用制备液相法同时得到多种淫羊藿黄酮的分离方法，提取方法工艺精简，原料药材淫羊藿来源广泛，成本低廉，提取分离过程环境友好，成本低廉，操作简便，可以分离得到大花淫羊藿苷A、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷SutchuenmedinA、斯皮诺鼠李糖苷、鼠李糖淫羊藿次苷II和淫羊藿次苷II多种成分，提高了淫羊藿的利用价值，适合实验室及工业化规模的生产需求。

主权项

一种用制备液相法同时得到多种淫羊藿黄酮的分离方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、将淫羊藿药材粉碎，称取3Kg，置于50L提取罐中，30L70％乙醇回流提取两次，每次3h，过滤，合并滤液，得提取液；S2、将步骤S1所得的提取液减压浓缩至1000mL，得淫羊藿粗提物浓缩液；S3、在步骤S2所得的浓缩液中加入2000mL95％乙醇，充分搅拌，室温静置24h，过滤，将滤液浓缩至500mL后，再加入2000mL95％乙醇，充分搅拌，室温静置24h，过滤，将滤液浓缩至无醇味，过高速离心机离心，得到淫羊藿醇沉组分600mL；S4、取步骤S3所得的淫羊藿醇沉组分，加样至己处理好的D‑101型大孔树脂层析柱中；依次用3倍柱体积的蒸馏水洗脱，3倍柱体积的30％乙醇洗脱，3倍柱体积的85％乙醇洗脱，得淫羊藿总黄酮液，浓缩备用；S5、步骤S4所得的淫羊藿总黄酮采用制备液相色谱分离。用初始流动相平衡色谱柱20min，取步骤S4所得的淫羊藿总黄酮浓缩液稀释5倍，进样，每次进样5mL，按设定梯度洗脱，紫外检测实时监控，根据峰及峰的保留时间进行收集，收集保留时间为16.72min、17.65min、18.45min、19.13min、20.48min、26.79min、27.95min和30.39min的共8个目标组分；S6、40min以后，按照初始梯度平衡色谱柱，再次进样，收集洗脱组分；共进样5次，将5次收集得到的洗脱组分按保留时间合并相同部分，浓缩，真空离心干燥得到不同黄酮成分；S7、将收集得到的各组份经HPLC检验纯度，纯度均大于98.5％。