一种柴油降解菌固定化颗粒的制备方法

摘要

一种柴油降解菌固定化颗粒的制备方法，其主要是将卤虫卵壳载体烘干处理后研磨成并高压灭菌；用LB培养基培养菌株Arthrobacter与高压灭菌的卤虫卵壳进行混合，在100～130rpm/min、25～37℃条件下吸附培养4-10h，吸附后，在无菌条件下，6000～12000rpm/min离心2～10min，将上层清液弃去，将卤虫卵壳载体加入到海藻酸钠溶液中，混合均匀后，再用移液枪将上述海藻酸钠溶液滴加到氯化钙溶液中，交联20-50min，得到3～5mm固定化颗粒；用无菌双蒸水将固定化颗粒表面没有包被的菌株冲洗下来，即得到柴油降解菌固定化颗粒，在4℃条件下保存。本发明操作简单、无二次污染，制得的固定化颗粒对柴油的降解性最高可达到65％。

主权项

一种柴油降解菌固定化颗粒的制备方法，其特征在于：(1)将卤虫卵壳载体放在烘干箱中进行50～70℃烘干处理，再用研磨器研磨，筛选出粒径为0.1～0.5mm的颗粒后高压灭菌；(2)用LB培养基培养菌株Arthrobacter，按每100mLArthrobacter菌悬液加入0.5～1.5g卤虫卵壳的比例，将步骤(1)高压灭菌的卤虫卵壳与Arthrobacter进行混合，在100～130rpm/min、25～37℃条件下吸附培养4‑10h，让菌株充分固定于卤虫卵壳载体中；(3)吸附后，在无菌条件下，6 000～12 000rpm/min离心2～10min，将上层清液弃去，按每100mL海藻酸钠溶液加入0.5～1.5g卤虫卵壳载体的比例，将步骤(2)的卤虫卵壳载体加入到浓度为2～3.0％的海藻酸钠溶液中，混合均匀后，再按每100mL海藻酸钠溶液加入500～800mL氯化钙溶液的比例，用移液枪将上述海藻酸钠溶液滴加到不断搅拌的浓度为4～5.0％氯化钙溶液中，交联20‑50min，得到3～5mm固定化颗粒；(4)将步骤(3)得到的固定化颗粒用无菌双蒸水冲洗2～4遍，将固定化颗粒表面没有包被的菌株冲洗下来，即得到柴油降解菌固定化颗粒，在4℃条件下保存。