一种枯草芽孢杆菌的发酵生产工艺

摘要

本发明涉及一种枯草芽孢杆菌的发酵生产工艺，包括如下步骤：1、将枯草芽孢杆菌接种与无菌培养试管中，摇床培养活化，作为一级发酵种子液；2、将一级发酵种子液接种到改进培养基中，继续活化摇床培养后作为二级发酵种子液；3、将活化的二级种子接种到发酵培养基中进行发酵培养，发酵罐培养；4、将发酵液在4000～8000rpm离心收集菌体，在30～50℃条件下烘干。本发明的有益效果为：采用葡萄糖为主要碳源的培养基组分，后期通过溶氧联动进行持续补料发酵可以大大提高菌体生长速率。该法制备的枯草芽孢杆菌菌体干粉，成本低廉，发酵工艺简单，生产周期短，具有广阔的生产应用前景。

主权项

一种枯草芽孢杆菌的发酵生产工艺，其特征在于：该方法包括如下步骤：(1)、将枯草芽孢杆菌接种与含1～10mL LB培养基的无菌培养试管中，在25‑37℃，150‑400rpm的条件下摇床培养活化10‑30h，LB培养基初始pH为6.5‑7.5，作为一级发酵种子液；(2)、将一级发酵种子液接种到改进培养基中，在培养温度为25～37℃，150‑‑400rpm的条件下继续活化摇床培养5～24小时后作为二级发酵种子液，接种量：体积比2‑10％，改进培养基初始pH为6.5‑8.0，改进培养基成分和浓度以1L计算为：葡萄糖5～l0g、酵母提取物5～l0g、蛋白胨15g～30g、KH₂P0₄ 0.5～2g、K₂HP0₄.3H₂O1～5g、(NH₄)₂S0₄ 2～3g；(3)、将活化的二级种子接种到发酵培养基中进行发酵培养，发酵罐培养，接种量：体积百分比为2—15％，温度25‑37℃，溶解氧控制在10％～90％，pH控制在6.5～7.5，培养时间30～96小时，培养过程中向发酵罐内加入补料培养基，发酵结束后收集罐内发酵液；(4)、将发酵液在4000～8000rpm离心收集菌体，在30～50℃条件下烘干30～96小时。