葫芦素C及其类似物的制备方法与应用

摘要

本发明涉及天然药物化学领域，具体提供一种黄瓜中葫芦素C及其类似物的制备方法与应用，所述葫芦素C类似物为去乙酰葫芦素C、二氢葫芦素C和二氢去乙酰葫芦素C。本发明通过实验证明，所述葫芦素C及其类似物具有抗癌细胞的细胞毒活性，可以用于癌症的治疗。

主权项

葫芦素C及其类似物的制备方法，其特征在于，葫芦素C如式(II)所示，葫芦素C类似物为去乙酰葫芦素C如式(III)所示、二氢葫芦素C如式(IV)所示和二氢去乙酰葫芦素C如式(V)所示；所述提取方法包括如下步骤：1)用乙醇提取黄瓜叶和/或黄瓜果实，然后除去乙醇，收集提取物；2)将所述提取物悬浮溶解于热水中，用石油醚进行萃取脱脂、脱色，移除石油醚萃取液，保留水层；3)将水层部分用大孔树脂进行分离，利用不同浓度的乙醇‑水溶液梯度洗脱，收集80％乙醇洗脱组分；4)将步骤3)所得组分进行正相硅胶柱层析，用二氯甲烷和甲醇混合溶剂体系梯度洗脱，收集体积比为10:1的二氯甲烷和甲醇混合液洗脱组分；5)将步骤4)所得组分进行正相硅胶柱层析，用石油醚和乙酸乙酯混合溶剂体系梯度洗脱，收集体积比为1:1和1:2的石油醚和乙酸乙酯混合液洗脱组分；6)将步骤5)所得组分用半制备HPLC进行纯化，仪器型号为waters600半制备型高效液相，W2487双波长检测器检测，所用半制备柱型号为Agilent SB C18 9.4×250mm，进行HPLC纯化；其中，将收集得到的体积比为1:1的石油醚和乙酸乙酯混合液洗脱组分分离纯化，使用流动相为体积比为60:40的甲醇‑水混合液，收集保留时间为15.5min和16.5min的洗脱峰，分别得到式(II)和式(IV)化合物；将收集得到的体积比为1:2的石油醚和乙酸乙酯混合液洗脱组分分离纯化，使用流动相为体积比为45:55的甲醇‑水混合液，收集保留时间为25.5min和28.2min的洗脱峰，分别得到式(III)和式(V)化合物。