| 摘要 |
1. Плазмидный вектор pET-His8-TrxL-Acip1 для экспрессии в клетках Escherichia coli антимикробного пептида аципенсина-1 в составе гибридного белка His8-TrxL-Acip1, состоящий из двух фрагментов ДНК:- BglII/XhoI-фрагмента с нуклеотидной последовательностью SEQ ID No. 2, содержащего промотор транскрипции Т7 РНК-полимеразы, lac-оператор, участок связывания рибосомы и участок, кодирующий аффинную метку, белок тиоредоксин и аципенсин-1;- BglII/XhoI-фрагмента плазмиды pET31b(+), содержащего терминатор транскрипции Т7 РНК-полимеразы, сайт инициации репликации, ген β-лактамазы и ген lac-penpeccopa (lacI).2. Штамм бактерии Escherichia coli BL21(DE3)/pET-His8-TrxL-Acip1 - продуцент гибридного белка His8-TrxL-Acip1, получаемый путем трансформации клеток родительского штамма BL21(DE3) плазмидным вектором pET-His8-TrxL-Acip1 по п. 1.3. Способ получения антимикробного пептида аципенсина-1, включающий экспрессию гибридного белка His8-TrxL-Acip1 в штамме-продуценте Escherichia coli BL21(DE3)/pET-His8-TrxL-Acip1 по п. 2, лизис клеток, аффинную очистку гибридного белка His8-TrxL-Acip1 на металлохелатном носителе, расщепление гибридного белка His8-TrxL-Acip1 бромцианом по остатку метионина, введенному между последовательностями аципенсина-1 и тиоредоксина, повторную металлохелатную очистку и очистку целевого пептида методом обращенно-фазовой ВЭЖХ. |
