一种巫山淫羊藿组培快繁方法

摘要

本发明公开了一种巫山淫羊藿组培快繁方法，巫山淫羊藿（Epimedium wushanense）为小檗科淫羊藿属多年生宿根性草本药用植物,是我国传统补益类中药。人工栽培虽已开展并建立了规范化种植基地，但是生产上栽培种苗主要是通过分株繁殖和根茎繁殖等传统方式繁育，由于病毒逐代传统，导致品质下降。以巫山淫羊藿嫩芽为外植体，通过不定芽诱导培养、增殖培养、生根培养、炼苗移栽获得了巫山淫羊藿离体再植株，建立巫山淫羊藿组织培养快速繁殖技术体系，较短的时间内获得大量的种苗,对于保护巫山淫羊藿野生资源、保证药源,实现其可持续利用都有十分重要的意义。

主权项

一种巫山淫羊藿组培快繁方法，其特征在于包括以下步骤：（1）外植体消毒：采取生长健康的巫山淫羊藿芽作为外植体,刮去芽痕,加洗洁精漂30min～50min，然后置于自来水下冲洗30～60min后移至超净工作台，用75%的酒精浸泡30～60s，再用0.1%HgCl₂消毒4～10min,无菌水冲洗后剥除外层鳞片,再用0.1%HgCl₂浸泡2～5min，无菌水冲洗外植体至无泡沫为止，置于无菌的滤纸上吸干表面水分，剥取芽尖组织备用；    （2）不定芽诱导：将已经灭菌芽剥去外层保护层,露出嫩绿的芽尖接种到诱导培养基进行不定芽诱导培养，接种后置于每天光照12～14小时，光照强度为1000～2000lx，置于培养温度为25～28℃，空气相对湿度为75%～80%的条件下培养15天后统计污染率，45天后统计诱导率；增殖培养：将诱导所得到的长至2cm左右的丛生芽再分割成2～3个芽的芽丛接种到增殖培养基上进行继代培养，接种后置于每天光照12～14小时，光照强度为1000～2000lx，置于培养温度为25～28℃，空气相对湿度为75%～80%的条件下培养60天后统计增殖情况；（4）生根培养：将芽增殖培养基中1～4cm长的正常生长的新芽切下并接种至生根培养基中进行诱导生根，接种后置于每天光照12～14小时，光照强度为2000～3000lx，置于培养温度为25～28℃，空气相对湿度为75%～80%的条件下培养30天后统计生根情况；（5）炼苗移栽：挑选生长良好且根系较为发达的组培苗,进行炼苗，首先,将所选组培苗的瓶盖揭开,在组培室里炼苗1～3天,炼苗过程中,注意喷水保持湿度，然后将这些组培苗搬至炼苗室,炼苗2～5天，之后将小苗取出,洗净培养基,注意防止根系损伤,栽植到由园土:泥炭土:腐殖质＝2:1:1混合成的基质中，移栽30天后统计成活率。