灵芝锰过氧化物酶毕赤酵母基因工程菌株构建及应用

摘要

一种分子生物学、基因工程领域的毕赤酵母基因工程菌株构建及应用，通过分子生物学技术从白腐真菌灵芝中克隆锰过氧化物酶基因GlMnP、构建含锰过氧化物酶基因表达框架的毕赤酵母表达载体pAO815‐GlMnP，将上述构建的毕赤酵母表达载体转化毕赤酵母(P.pastoris)SMD1168H，并通过氨苄青霉素抗性筛选获得表达载体高拷贝重组的含锰过氧化物酶基因表达框架的毕赤酵母工程菌。本发明通过构建基因工程菌并以工业方式量产生物酶，能够应用于脱除生产、污水等体系中的偶氮染料，如对纺织工业废水、印染工业废水及其与染料生产和使用相关的工业废水的脱色。

主权项

一种锰过氧化物酶基因GlMnP的表达方法，通过从灵芝中克隆出锰过氧化物酶基因GlMnP，经HindIII和EcoRI双酶切后克隆入毕赤酵母表达质粒并构建出表达载体，最后将其转化入毕赤酵母表达宿主菌中，经培养扩增和筛选后得到毕赤酵母工程菌；所述的锰过氧化物酶基因GlMnP的核苷酸序列如Seq ID.No.1所示。