发明名称 一种通过聚合染色体片段导入系同步改良棉花纤维长度、强度和细度的分子育种方法
摘要 本发明属于分子育种领域,涉及一种通过聚合染色体片段导入系同步改良棉花纤维长度、强度和细度的分子育种方法。以IL080-D6-1和1047(IL019‐A2‐6染色体片段导入系)2个导入系为非轮回亲本分别和轮回亲本(新疆0768),进行杂交1次,回交2代,在BC<sub>2</sub>F<sub>1</sub>将含不同染色体片段的株系间互交,得到双片段聚合的F2分离群体,通过2个片段上的各2个分子标记鉴定出双片段纯合的单株,进行四环镜的田间试验,并继续自交2代得到双片段纯合且纤维长度、纤维强度和细度得到极显著改良的棉花新品系。利用这一方法,已经培育出优质、高产的棉花新品系“南农08‐66”。
申请公布号 CN103509861B 申请公布日期 2015.05.13
申请号 CN201310350208.1 申请日期 2013.08.12
申请人 南京农业大学 发明人 张天真;曹志斌;王鹏
分类号 C12Q1/68(2006.01)I;A01H1/02(2006.01)I;A01H1/04(2006.01)I;A01H5/00(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 南京天华专利代理有限责任公司 32218 代理人 徐冬涛;傅婷婷
主权项 一种通过聚合染色体片段导入系同步改良棉花纤维长度、纤维强度和马克隆值的分子育种方法,其特征在于包括:1)以新疆棉区品系0768为轮回亲本母本,以IL080‑D6‑1和1047为非轮回亲本父本,杂交1代杂交产生BC<sub>1</sub>F<sub>1</sub>,以0768为父本,BC<sub>1</sub>F<sub>1</sub>为母本配制杂交产生BC<sub>2</sub>F<sub>1</sub>,每代都是混收混种;所述的品系0768保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,菌种保藏号为CGMCC NO.7559,所述的IL080‑D6‑1保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,菌种保藏号为CGMCC NO.4685,所述的品系1047保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,菌种保藏号为CGMCC NO.7754;2)分子标记辅助第一次选择:BC<sub>2</sub>F<sub>1</sub>种植,应用CTAB法提取DNA,采用IL080‑D6‑1导入片段上的分子标记NAU3677和NAU1454及1047导入片段上的分子标记NAU3419和NAU2277进行PCR扩增,选择同时含有2个分子标记条带分别为NAU3677和 NAU1454的单株与同时含2个分子标记条带分别为NAU3419和NAU2277单株进行杂交,收获杂交种子并种植得到2个片段聚合的杂合植株继续自交;其中所述的分子标记NAU3677正向引物为SEQ ID NO.1,反向引物为SEQ ID NO.2,PCR产物大小为180bp;所述的分子标记NAU1454正向引物为SEQ ID NO.3,反向引物为SEQ ID NO.4,PCR产物大小为300bp;所述的分子标记NAU3419正向引物为SEQ ID NO.5,反向引物为SEQ ID NO.6,PCR产物大小为400bp;所述的分子标记NAU2277正向引物为SEQ ID NO.7,反向引物为SEQ ID NO.8,PCR产物大小为120bp;3)分子标记辅助第二次选择: 种植2个片段聚合F<sub>2</sub>分离群体,每株提取DNA后,再利用分子标记NAU3677和NAU1454及分子标记NAU3419和NAU2277进行前景选择确定F<sub>2</sub>单株的基因型,同时只有4个分子标记条带分别为180bp、300bp、400bp、120bp的单株利用表4所示的61个多态性标记对这些纯合单株进行遗传背景选择,将这些纯合单株继续进行南京及新疆石河子四环境下的田间试验并自交2代至F<sub>2</sub><sub>:</sub><sub>4</sub>,在F<sub>2</sub><sub>:</sub><sub>4</sub>家系中选择纤维长度32.00‑33.70mm,纤维强度34.4‑35.7cN/tex,马克隆值3.01‑3.45,单铃重5.55‑6.05 g,衣分36.8‑37.2%的纤维品质显著改良家系为改良棉花纤维长度、纤维强度和马克隆值的育成品系。
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