一种检测猪蓝耳病活疫苗JXA1-R株的方法及试剂盒

摘要

本发明公开了一种检测猪蓝耳病活疫苗JXA1-R株的方法及试剂盒。检测方法是采用RFLP分析法，设计合成扩增JXA1-R株ORF1a 3195～3682位核苷酸片段的引物，提取待检样品中的RNA，通过RT-PCR扩增JXA1-R株ORF1a 3195～3682位核苷酸片段，扩增产物经限制性核酸内切酶SacⅡ切割后，产物进行琼脂糖凝胶电泳，出现长度487bp的条带时判断为该待检样品中含有猪蓝耳病活疫苗JXA1-R株。所述试剂盒主要包括上述的引物及限制性核酸内切酶SacⅡ。本发明应用普通PCR和一些常规仪器即可完成检测，步骤简单，缩短了检测时间，也显著降低了检测成本。

主权项

一种检测猪蓝耳病活疫苗JXA1‑R株的方法，其特征在于，采用RFLP分析法，设计合成扩增猪蓝耳病活疫苗JXA1‑R株ORF1a 3195～3682位核苷酸片段的引物，提取待检样品中的RNA，通过RT‑PCR，用所述引物扩增JXA1‑R株ORF1a 3195～3682位核苷酸片段，扩增产物与限制性核酸内切酶SacⅡ进行酶切反应，酶切产物经过琼脂糖凝胶电泳后出现长度487bp的条带时判断为待检样品中含有猪蓝耳病活疫苗JXA1‑R株;所述RT‑PCR为一步法RT‑PCR，所述引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:1~2所示。