一种从血液中提取的抗氧化酶

摘要

本发明涉及一种从血液中提取的抗氧化酶。动物的血液中含有丰富的抗氧化物质，且动物血液的资源丰富，是生物技术领域中提取抗氧化酶的重要来源。具体而言，本发明提供的抗氧化酶提取自动物血液，采用常规分离方法从血液中分离出红细胞后，把红细胞破碎，加入由氯仿和95％乙醇混合而成的溶剂进行萃取，获得富含抗氧化酶的粗酶液；所得粗酶液经硫酸铵沉淀后，将沉淀的物质依次通过葡聚糖凝胶柱和金属螯合亲和柱，选择特定pH值和浓度的缓冲液作为流动相进行洗脱纯化，最终得到纯度高、酶活性高的抗氧化酶产物。本发明进一步保护所述从血液中提取的抗氧化酶在制备化妆品中的应用。

主权项

一种从血液中提取的抗氧化酶，其特征在于，所述抗氧化酶由包括以下步骤的方法制备而成：1)从血液中分离出血红细胞，将洗净后的血红细胞与水混合，破碎血红细胞得提取液，在所得提取液中加入氯仿和95％乙醇混合溶剂萃取，取上层溶液，加入硫酸铵静置、离心、收集沉淀；2)将步骤1)所得沉淀溶解于pH7.3～7.5的0.01～0.02mol/L磷酸盐缓冲液中，将所得溶液加入平衡好的葡聚糖凝胶柱Sephadex G‑25顶端，用本步骤所述磷酸盐缓冲液进行洗脱，收集含有蛋白质且不含硫酸铵的洗脱液，浓缩，得浓缩液；3)在步骤2)所得浓缩液中加入NaCl，得到NaCl浓度为0.4～0.6mol/L的溶液，将所得溶液加入平衡好的金属螯合亲和柱顶端，用pH值4.1～4.9的0.015～0.025mol/L柠檬酸缓冲液进行洗脱，收集含有蛋白质的洗脱液；至洗脱液中检测不到蛋白质时，停止收集；4)将步骤3)所得洗脱液浓缩冷冻干燥，即得抗氧化酶。