豆科黄芪属多年生草本植物中一种致毒物检测方法

摘要

本发明公开豆科黄芪属多年生草本植物中一种致毒物检测方法。本发明的方法是：先将待检测植物粉碎后用醇与水的溶液或丙酮进行浸取提取，将所得到的提取液浓缩得到浸膏，再将浸膏用水溶解后用等体积的乙酸乙酯进行萃取，然后检测萃取液中化合物7，3′-二羟基-2′，4′-二甲氧基-异黄烷的含量，根据检测得到被检植物中所含的化合物7，3′-二羟基-2′，4′-二甲氧基-异黄烷含量的多少确定被检植物是否属于染病有毒的病株。

主权项

豆科黄芪属多年生草本植物中一种致毒物‑7，3′‑二羟基‑2′，4′‑二甲氧基‑异黄烷的含量的检测方法，将待检测植物粉碎后用醇与水的溶液或丙酮进行浸泡提取，将所得到的提取液浓缩得到浸膏，再将浸膏用水溶解后用等体积的乙酸乙酯进行萃取，将所得到的乙酸乙酯萃取物用体积比2∶1的氯仿/甲醇溶解后用葡聚糖凝胶Sephdex LH‑20过柱以除去色素，洗脱剂为体积比为2∶1的氯仿/甲醇，经处理后的样品溶解于色谱纯甲醇中，并用容量瓶定容至25mL，最后经0.45μm微孔滤膜过滤，作为供试样品；然后将上述供试样品进行梯度洗脱，梯度洗脱程序为：0.1％醋酸水溶液为A，10％乙腈甲醇溶液为B，0～10min，54％B；10～25min，54％～57％B；25～45min，57％～75％B；45～50min，75％～85％B；50～60min，85％～100％B，流速0.63ml/min，UV检测波长280nm，柱温为室温，进样量10μL，理论塔板数不低于4000，对照品与周围的峰的分离度大于1.5％，得到色谱图；将所得到的色谱图中的峰面积代入线性回归方程：y＝2.20×10⁶x+5236.44，R²＝0.9999；线性范围为0.01‑50μg，即得到被测植物中7，3′‑二羟基‑2′，4′‑二甲氧基‑异黄烷的含量。