一种同位素稀释质谱法测定胰岛素含量的方法

摘要

本发明公开了一种同位素稀释质谱法测定胰岛素含量的方法，包括如下步骤：(1)合成同位素标记的胰岛素B链并配制成溶液作为内标；(2)制备胰岛素标准和胰岛素样品溶液；(3)取胰岛素标准溶液和样品溶液并分别加入同位素标记的胰岛素B链；(4)将所述预处理后的胰岛素标准溶液和胰岛素样品进行质谱分析；(5)计算所述胰岛素样品溶液中胰岛素含量。本发明同位素稀释质谱法测定胰岛素含量的方法具有准确度高，结果可靠的优点。

主权项

一种同位素稀释质谱法测定胰岛素含量的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)合成同位素标记的胰岛素B链肽段并配制成同位素标记的胰岛素B链肽段溶液作为内标；(2)制备胰岛素标准溶液和胰岛素样品溶液；(3)将所述胰岛素标准溶液和所述胰岛素样品溶液进行预处理：取所述胰岛素样品溶液1mL并称重，加入1mL所述同位素标记的胰岛素B链肽段溶液并称重，混匀得到加标溶液，然后还原，得到还原后的胰岛素样品溶液，根据所述胰岛素样品溶液中胰岛素的质量分数进行预处理；所述预处理步骤如下：将所述还原后的胰岛素样品溶液进行固相萃取后用MALDI‑TOF基质混匀后点在靶板上，自然晾干；当所述胰岛素样品溶液中胰岛素质量分数≥10^‑7g/g时，将所述还原后的胰岛素样品溶液用MALDI‑TOF基质混匀后点在靶板上，自然晾干；或将其进行固相萃取后用MALDI‑TOF基质混匀后点在靶板上，自然晾干；取所述胰岛素标准溶液1mL按照与上述步骤同样的步骤进行预处理；(4)将预处理后的所述胰岛素标准溶液和所述胰岛素样品溶液进行质谱分析；(5)计算所述胰岛素样品溶液中胰岛素含量。