一种中药组合物制剂中有效成分的分离和鉴定方法

摘要

本发明公开了一种中药组合物制剂中有效成分的分离和鉴定方法，属于中药领域，具体分离方法为：提取、大孔吸附树脂纯化、高效液相色谱纯化、凝胶柱纯化；本发明从该中药组合物中间药材中分离提取出有效的活性成分，同时对部分药物进行了定量鉴别，保证了药物的疗效和质量。

主权项

一种中药组合物制剂中有效成分的分离和鉴定方法，所述中药组合物由如下重量份的原料药制成：黄芪 150‑450份、附子40‑120份、人参或党参75‑225份、丹参75‑225份、葶苈子50‑150份、香加皮或南五加皮60‑180份、泽泻75‑225份、玉竹25‑75份、桂枝30‑90份、红花30‑90份、陈皮25‑75份；其特征在于所述方法由以下步骤构成：A、提取：称取所述中药组合物制剂，加蒸馏水溶解，静置过夜，过滤；B、大孔吸附树脂纯化：量取AB‑8型大孔树脂柱装柱，依次以水，10%、30%、50%、70%和95%乙醇梯度各洗脱5倍柱体积，回收溶剂得到各段浸膏；C、硅胶H装中低压液相色谱柱，95%醇洗部分浸膏以甲醇溶解，薄层硅胶H拌样， 挥干，上样，以石油醚‑丙酮系统梯度洗脱，得到组分Fr.1～Fr.5；进行制备高效液相分离纯化，得到化合物杠柳苷△5‑孕烯‑3β‑20（S）‑二醇‑20‑O‑β‑D‑吡喃葡萄糖基‑(1→6)‑β‑D‑吡喃葡萄糖基‑(1 →2)‑β‑D‑吡喃洋地黄糖苷；D、反相硅胶ODS‑A装中低压液相色谱柱，50%醇洗部分浸膏以甲醇溶解，每次50mL上样，以乙腈‑水系统梯度洗脱，合并成分组成相近流分，将收集到的组分分别进行制备高效液相分离纯化，得到化合物人参皂苷Rd、20（S）‑人参皂苷Rh1、20（S）‑人参皂苷Rg2、毛蕊异黄酮和黄芪皂苷Ⅰ；E、30%醇洗部分浸膏以水溶解，过滤，上葡聚糖凝胶sephadex LH‑20凝胶柱，以30%乙醇洗脱，收集各段流出物，利用高效液相分析和制备得到化合物山柰酚‑3‑O‑β‑D‑芸香苷、橙皮苷、迷迭香酸甲酯、和迷迭香酸乙酯。