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一种制备河豚毒素的方法，其特征在于，具体包括如下步骤：步骤一：浸泡将河豚鱼肝或鱼子切成条或块后，用去离子水或纯化水浸泡，得到料液，浸泡至料液不再含毒为止；步骤二：沉降将步骤一所得的料液置于6～10℃沉降放置10～12小时，分出上清液，并将沉淀物离心并过滤除渣后再与上清液混合得到澄清液；步骤三：絮凝将步骤二所得的澄清液用氨水溶液调PH至7～9，加入絮凝剂溶液调节PH至4～6，搅匀，静置沉降，然后分出上清液，并将沉淀物经过高速离心并过滤除渣后再与上清液混合；步骤四：离子交换将步骤三混合所得的料液，上离子交换柱，交换至PH6.5～7.0,交换结束后用去离子水或纯化水冲柱至澄清，然后以醋酸溶液洗脱，收集含目标产物的组分，以氨水溶液调PH至5～7，减压浓缩得到浓缩液。步骤五：低压柱层析将步骤四所得的浓缩液和干硅胶拌好，上低压硅胶柱进行分离，并加入组成为正丁醇、醋酸和水的洗脱液进行洗脱，收集含目标产物的流出液部分，过滤得到滤液，减压浓缩得到浓缩液。步骤六：高效液相色谱柱将步骤五所得浓缩液注入平衡后的高效液相色谱柱,以醋酸溶液洗脱，收集含目标产物的流出液减压浓缩，得到浓缩液。步骤七：结晶将步骤六所得的浓缩液用氨水溶液调PH至8～9，冷藏，析出结晶，滤出，用无水乙醇洗涤，常温减压干燥即得河豚毒素高纯单体结晶。 |
