基于核酸适体的快速检测方法及试剂盒

摘要

本发明公开了基于核酸适体的快速检测方法及试剂盒。本发明利用两种核酸适体，两种适体作用于同一靶标，一种用于纯化，另一种作为等温链置换扩增（stranddisplacement amplification，SDA）的模版以便进行扩增，最后对扩增得到的ssDNA进行快速检测。本发明方法具有操作简便，无需对待测样品进行复杂的前处理；检测成本低，对检测仪器的要求低，检测结果准确可靠，特别适用于基层及偏远地区使用。当本发明用于微生物检测时，免去了微生物的核酸提取，但同时实现核酸扩增，有利于实现微生物的定性和定量分析。

主权项

基于核酸适体的快速检测方法，包括如下步骤：1)设计得到两种针对待检物的核酸适体，记为A1和A2，在A1的5’端连接有等温链置换扩增引物序列及切刻酶识别位点，在A2的一端修饰有分离标记，得到修饰后的核酸适体A1和A2； 2)将修饰后的核酸适体A1和A2与样品混合，充分反应，之后利用A2上的分离标记将样品富集、分离，得到浓缩样品；3)将浓缩样品置于含有切刻酶的等温链置换扩增反应体系中进行等温扩增；4)检测扩增得到的ssDNA的量，确定待检物的浓度。