主权项 |
一种中药组合物制剂中多种活性成分含量的测定方法,该中药组合物制剂由下列重量份的原料药制成: 连翘200‑300 金银花200‑300 板蓝根200‑300 大黄40‑60 广藿香60‑100 绵马贯众200‑300 红景天60‑100 薄荷脑5‑9 麻黄60‑100 苦杏仁60‑100 鱼腥草200‑300 甘草60‑100 石膏200‑300,其特征在于该测定方法由以下步骤组成:A、供试品溶液的制备:称取该中药组合物制剂1‑2g,加甲醇50mL,称定重量,超声提取10‑30min,放冷、称重,用甲醇补足重量,过滤,摇匀,即得;B、对照样品溶液的制备:分别称取绿原酸、连翘酯苷A、隐绿原酸、3,4‑二咖啡酰奎宁酸、4,5‑二咖啡酰奎宁酸对照品,加70%甲醇,摇匀,即得不同浓度的各对照品溶液;C、UPLC检测:色谱柱为C18,柱温40℃,流动相为甲醇‑乙腈‑0.1%磷酸溶液,梯度洗脱:0‑2min,3%甲醇,3%乙腈,94%的0.1%磷酸;2‑3min,3%‑5%甲醇,3%‑5%乙腈,94%‑90%的0.1%磷酸;3‑10min,5%‑20%甲醇,5%乙腈,90%‑75%的0.1%磷酸;10‑13.5min,20%甲醇,5%乙腈,75%的0.1%磷酸;13.5‑22.5min,85%甲醇,5%乙腈,10%的0.1%磷酸;检测波长237nm,流速为0.2‑0.4mL/min;D、标准曲线的制定及计算结果:分别将绿原酸、连翘酯苷A、隐绿原酸、3,4‑二咖啡酰奎宁酸、4,5‑二咖啡酰奎宁酸对照品溶液0.5‑10mL注入步骤C中超高效色谱仪中分析,以色谱峰面积为纵坐标,进样量横坐标,得到各对照品溶液的标准曲线;然后将供试样品溶液注入超高效色谱仪中分析,将各成分峰面积带入标准曲线中,得到绿原酸、连翘酯苷A、隐绿原酸、3,4‑二咖啡酰奎宁酸、4,5‑二咖啡酰奎宁酸的含量。 |