毛葡萄茎尖的包埋干燥超低温保存方法

摘要

本发明公开了一种毛葡萄茎尖的包埋干燥超低温保存方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)茎尖包埋干燥超低温冷冻保存：取继代腋芽饱满的组培苗，在光照低温锻炼，后剥取组培苗腋芽茎尖，制成茎尖包埋丸，再将包埋丸在蔗糖固体培养基中预培养，干燥后的茎尖包埋丸置于液氮中冷冻24h以上；(2)解冻及恢复后再生培养：茎尖包埋丸冷冻保存后，解冻，然后取包埋丸茎尖接种到恢复培养基上进行恢复培养和继代培养得到再生茎尖;(3)生根培养：取步骤二中的再生茎尖置于生根培养基中进行生根培养；(4)炼苗移栽：将培养30-40d的生根苗的根部清洗，KMnO₄浸根，移栽至盛有灭菌蛭石的营养钵中用1/8MS营养液浇灌，然后放入培养室培养2-3d后浇灌杀菌剂，待地上部叶色加深后转移到盛有营养土的营养钵中继续温室锻炼，生长2~3个月左右，翌年春移栽大田。

主权项

一种毛葡萄茎尖的包埋干燥超低温保存方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）茎尖包埋干燥超低温冷冻保存：取继代腋芽饱满的组培苗，在光照低温锻炼，后剥取组培苗腋芽茎尖，制成茎尖包埋丸，再将包埋丸在蔗糖固体培养基中预培养，干燥后的茎尖包埋丸置于液氮中冷冻24 h以上；（2）解冻及恢复后再生培养：茎尖包埋丸冷冻保存后，解冻，然后取包埋丸茎尖接种到恢复培养基上进行恢复培养和继代培养得到再生茎尖；              （3）生根培养：取步骤二中的再生茎尖置于生根培养基中进行生根培养；（4）炼苗移栽：将培养30‑40d的生根苗的根部清洗，KMnO₄浸根，移栽至盛有灭菌蛭石的营养钵中用1/8MS营养液浇灌，然后放入培养室培养2‑3 d后浇灌杀菌剂，待地上部叶色加深后转移到盛有营养土的营养钵中继续温室锻炼，生长2~3个月左右，翌年春移栽大田。