一种替考拉宁的纯化方法

摘要

本发明提供一种替考拉宁的纯化方法，该纯化方法包括如下步骤：(1)调节替考拉宁发酵液至碱性后进行过滤；(2)将步骤(1)得到的滤液调节至酸性后通过大孔吸附树脂，依次用水、氨水洗脱，收集氨水洗脱液；(3)将步骤(2)得到的洗脱液过滤，滤液通过硅胶层析分离，收集体积比为10-50％乙醇水溶液的洗脱液；(4)将步骤(3)得到的洗脱液调节至酸性后通过截流分子量为5000～30000Da，优选为10000Da的超滤膜进行超滤，得到超滤液；以及(5)将步骤(4)得到的超滤液通过截流分子量为100～1000Da，优选为200Da的纳滤膜进行纳滤，浓缩得到替考拉宁。本发明的纯化方法最大限度地提高了替考拉宁的生产效率从而实现了高纯度替考拉宁的产业化生产。

主权项

一种替考拉宁的纯化方法，该纯化方法包括如下步骤：(1)调节替考拉宁发酵液至pH9‑11后进行过滤；(2)将步骤(1)得到的滤液调节至pH为6.5‑7.5后通过大孔吸附树脂，依次用水、氨水洗脱，收集氨水洗脱液；所述大孔吸附树脂为FX‑06；(3)将步骤(2)得到的洗脱液过滤，滤液通过硅胶层析分离，收集体积比为10‑50％乙醇水溶液的洗脱液；通过所述硅胶层析分离的滤液的pH为6.5‑7.5；(4)将步骤(3)得到的洗脱液调节至pH为6.5‑7.5后通过截流分子量为10000Da的超滤膜进行超滤，得到超滤液；以及(5)将步骤(4)得到的超滤液加入环氧乙烷，升温到30‑50℃，搅拌，然后通过截流分子量为200Da的纳滤膜进行纳滤，浓缩得到替考拉宁；所述纯化方法还包括将得到的替考拉宁在‑40～‑50℃下冻干的步骤；其中，在所述步骤(3)中，所述洗脱液先进行如下处理，然后再过滤：向所述洗脱液中加入30％的丙酮，在80摄氏度下反应2个小时，倒入冰水中，盐析出白色沉淀物，然后过滤掉沉淀物。