一种快速提取油菜微量DNA的方法

摘要

本发明属于油菜基因组DNA制备技术领域，具体涉及一种快速提取油菜微量DNA的方法。主要步骤包括：向植物器官和/或组织中加入提取缓冲液Buffer，破碎得到植物粉末；于94-100℃水浴培养10min，离心后吸取上清液得到含有DNA的提取液，该提取液稀释后可保存于-20℃下或直接用于PCR反应。与现有的常规CTAB法相比，本发明在PCR扩增方面无明显差异，但具有速度快，操作步骤简单，效率高、无毒害等明显优势。

主权项

一种快速提取油菜微量DNA的方法，其特征在于如下步骤：(1)采集甘蓝型油菜幼嫩叶片9‑10mg装入2ml离心管，置于冰盒中；(2)加入250ul提取缓冲液Buffer及钢珠，磨样机中研磨3min；(3)置于94‑100℃水浴培养10min，或水浴培养不超过12min，避免影响质量；(4)在12000rpm下，离心5min；(5)吸取上清液，或根据需要，最多吸取50ul上清液，加入超纯水稀释9‑10倍，于‑20℃保存或取2‑3ul直接用于PCR反应；其中：所述提取缓冲液Buffer的配方，由500ml 1M的Tris‑HCl(pH7.5)，17.55g NaCl和102.6g蔗糖加蒸馏水定容至1L后混匀配制而成。