一种制备葡萄糖氧化酶的方法

摘要

本发明涉及一种固态发酵制备胞外葡萄糖氧化酶的方法，采用橘青霉CICC40277固体发酵得到发酵液，然后经离心、超滤，二次沉淀，过滤，冻干，即得到葡萄糖氧化酶制品。本方法得到的葡萄糖氧化酶酶活高，收率高，本方法简单易操作，生产效率高，易于控制，为固态发酵生产葡萄糖氧化酶提供参考。

主权项

一种制备葡萄糖氧化酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)以橘青霉(Penicillium citrinum Thom.)为出发菌株，用无菌水进行洗脱，稀释得到橘青霉孢子悬液；(2)挑取步骤(1)获得的橘青霉孢子悬液接种于斜面培养基，置于恒温箱中放大培养，培养条件为：28～32℃，2～5天；(3)将步骤(2)培养得到菌种用无菌水进行洗脱，得到孢子悬浮液；(4)挑取步骤(3)获得孢子悬浮液接种于固体发酵培养基，接种量为10％～20％(v/v)，将固体发酵培养基置于摇床中震荡培养，可得到葡萄糖氧化酶发酵液。(5)将发酵液进行离心、超滤浓缩除盐，得到葡萄糖氧化酶粗酶液；(6)将步骤(5)所得粗酶液经甲醇、丙酮相结合二次沉淀，过滤，滤饼冻干，即得到葡萄糖氧化酶制品。