一种超声辅助酶解去糖基化制备低致敏大豆7S蛋白的方法

摘要

一种超声辅助酶解去糖基化制备低致敏大豆7S蛋白的方法，属于食品生物技术领域。本发明首先以大豆为原料，经脱脂、提取大豆7S蛋白、超声处理，然后向其添加十二烷基磺酸钠、β-巯基乙醇等变性剂将蛋白进行改性处理，再加入一定酶活的糖苷酶在一定条件下进行去糖基化处理，离心取上清液，最后经冷冻干燥得到低致敏大豆7S蛋白粉。本发明提供了一种降低大豆7S蛋白过敏原致敏性的新方法，其工艺简单、条件温和、易于控制；产品致敏性低，营养价值高，特别适用于大豆过敏患者的消费需求，具有良好的推广和应用前景，可用于低致敏食物的生产和加工过程中。

主权项

一种超声辅助酶解去糖基化制备低致敏大豆7S蛋白的方法，其特征是按以下步骤：（1）称取一定质量的新鲜干大豆，研磨成粉末，脱脂风干，按照常规方法提取大豆7S蛋白；（2）将步骤（1）中所提取的大豆7S蛋白在水浴超声装置中超声处理，超声功率为300‑500W，时间为60min，然后向大豆7S蛋白溶液中加入0.05%（kg/L）十二烷基磺酸钠、0.1%（kg/L）β‑巯基乙醇，在100℃加热10 min，将蛋白浓度稀释至1g/L，加入糖苷酶，酶解温度37℃，酶添加量200‑1000U/mg蛋白，震荡速度300 rpm，时间24‑36h，期间保持反应体系相对稳定，反应结束后在100℃灭酶10 min，快速冷却反应液；（3）将步骤（2）中所得的酶解液在‑80℃预冻12 h，然后在冷冻温度为‑65℃、真空度100 Pa、加热板温度50℃条件下，真空冷冻干燥，至水分含量≤5%，所得粉末即为低致敏大豆7S蛋白；步骤（2）所述的糖苷酶为肽 N‑糖苷酶 F、内切糖苷酶H、内切‑β‑乙酰葡萄糖胺苷酶或糖肽酶A中的任意一种。