阻断HIV-1膜融合的小环型DNA重组载体及其应用

摘要

本发明提供一种能真核外分泌表达HIV-1膜融合抑制蛋白HR212的小环型DNA重组载体，其包含编码HR212的核苷酸序列和小环DNA载体。本发明还提供阻断HIV-1膜融合过程的小环型DNA基因治疗剂，其包含能真核外分泌表达HIV-1膜融合抑制蛋白HR212的小环型DNA重组载体，其有效成分是编码七肽重复三螺旋蛋白HR212的核苷酸，该核苷酸通过小环型DNA载体方式，转染真核细胞后，在细胞内表达并通过外分泌或者细胞外膜表达方式释放到细胞外，通过阻断病毒进入宿主细胞过程，发挥抑制HIV-1病毒感染的作用。本发明还提供编码七肽重复三螺旋蛋白HR212的小环型DNA重组载体在制备用于抗HIV-1的感染的基因治疗剂中的应用。

主权项

能真核外分泌表达HIV‑1膜融合抑制蛋白HR212的小环型DNA重组载体，其包含编码HR212蛋白的核苷酸序列和小环DNA载体，其中骨干序列是编码HR212蛋白的核苷酸序列，所述HR212蛋白是由HIV‑1的一个氨基端七肽重复序列以及两个羧基端的七肽重复序列构成的三螺旋蛋白，其排列顺序为：NH₂HR2‑linker1‑HR1‑linker2‑HR2COOH，其中HR1的氨基酸序列如SEQ ID No.33所示，HR2的氨基酸序列如SEQ ID No.34所示，其中linker表示接头序列，linker1和linker2所示的两个接头的氨基酸序列独立地选自SEQ ID Nos.12，14，16，和18，其中在HR212蛋白的N端具有信号肽38sp，其氨基酸序列所SEQ ID No.20所示，其中所述小环型DNA重组载体通过将选自SEQ ID Nos.22和24‑26的任一种核苷酸序列经由限制性酶切插入到小环DNA载体中构建而成。