双水相系统萃取血清中抗体的方法

摘要

本发明公开一种双水相系统萃取血清中抗体的方法，为一种新的取血清中抗体的方法，克服了传统取血清中抗体的方法得率低、含杂质多、制备繁琐、活性低等特点。采用乙酸钠作为盐水相中的盐使用。既提高了抗体的得率而且为今后乙酸钠在工业生产提供依据。提取设备要求简单，室温下可操作；所提取的抗体纯度较高，活性无影响；得率大大提高；萃取时间大大缩短；可用于扩大生产。扩大生产后得率不改变。

主权项

一种双水相系统萃取血清中抗体的方法，其特征在于包括以下步骤：1）制备免疫血清；2）制备双水相系统：先配好浓度为50%（w/w）分子量为3350的聚乙二醇储存液；浓度为40%（w/w）盐溶液：硫酸铵与乙酸钠质量比为3:1；将聚乙二醇储存液、盐溶液、血清按体积比4.5:4.5:1混合；体系PH定为7.0；3）室温静止至双水相系统分层，待双水相系统明显分层后转入离心机1400r/min，离心15分钟；4）离心后双水相系统明显分三层，上层为聚乙二醇层，下层为盐水相层；中间层为抗体层；排除下层和上层后，取出中间层的抗体，经检测抗体效价在85%‑90%；5）对抗体进行透析除盐；6）将透析后的抗体加入5%的蔗糖进行冻干保存，延长了抗体的保存时间及对抗体进行浓缩。