发明名称 |
一种磷脂酶A<sub>2</sub>突变体及其制备方法 |
摘要 |
本发明涉及一种磷脂酶A<sub>2</sub>突变体及其制备的方法,其技术方案是利用重组DNA技术定点突变来源于天蓝色链霉菌的野生型磷脂酶A<sub>2</sub>的Glu37、Asp78的氨基酸残基,得到活力较高的磷脂酶A<sub>2</sub>基因,然后将高活力磷脂酶A<sub>2</sub>基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统(包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统)中表达,得到产高活力磷脂酶A<sub>2</sub>的重组菌株,表达后,检测高活力磷脂酶A<sub>2</sub>的比酶活较野生型磷脂酶A<sub>2</sub>提高13.7%,其中枯草芽孢杆菌高活力磷脂酶A<sub>2</sub>重组菌发酵后磷脂酶A<sub>2</sub>的酶活可达到53.5U/ml,毕赤酵母游离表达高活力磷脂酶A<sub>2</sub>重组菌的酶活可达106.4U/ml,毕赤酵母细胞表面展示高活力磷脂酶A<sub>2</sub>全细胞催化剂的酶活可达260U/(g·干细胞)。 |
申请公布号 |
CN104017786A |
申请公布日期 |
2014.09.03 |
申请号 |
CN201410279966.3 |
申请日期 |
2014.06.20 |
申请人 |
天津科技大学 |
发明人 |
路福平;刘逸寒;张涛;刘晓光;王正祥;王春霞;王建玲 |
分类号 |
C12N9/16(2006.01)I;C12N15/75(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12N15/81(2006.01)I;C12N1/19(2006.01)I;C12R1/125(2006.01)N;C12R1/84(2006.01)N |
主分类号 |
C12N9/16(2006.01)I |
代理机构 |
北京鼎佳达知识产权代理事务所(普通合伙) 11348 |
代理人 |
王伟锋 |
主权项 |
一种磷脂酶A<sub>2</sub>突变体,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示。 |
地址 |
300457 天津市滨海新区经济技术开发区第十三大街29号03信箱 |