一种抗人甲状旁腺激素的纳米抗体及其筛选方法和应用

摘要

本发明公开了一种抗人甲状旁腺激素(PTH)的纳米抗体及其制备方法和应用。本发明采用定点固载抗原后用于筛选抗体的方法，即在人甲状旁腺激素基因的碳末端加上一个半胱氨酸，进行原核表达纯化，并通过该半胱氨酸与马来酰亚胺的反应固定到ELISA板上，解决了传统筛选过程中亲水性抗原不易结合的问题，也解决了小分子抗原结构容易改变这一问题，更有利于筛选到针对正确结构的抗体，筛选出的抗体更具竞争力。本发明的纳米抗体对PTH具有很高的特异性亲和活性，其亲和常数在10⁹M^-1以上，可应用于纯化蛋白、制备吸附剂材料、制备血液净化吸附材料、进行蛋白浓度检测等方面。

主权项

一种抗甲状旁腺激素的纳米抗体，所述纳米抗体包括框架区、互补决定区和铰链区，所述框架区由四个区域组成，分别为FR1、FR2、FR3、FR4，其中所述FR1的氨基酸序列选自SEQ ID NO.15、19、23、27、30、33、36、41、46、48、51、55中的一种，所述FR2的氨基酸序列选自SEQ ID NO.16、20、24、28、31、34、37、42、43、49、52、56中的一种，所述FR3的氨基酸序列选自SEQ ID NO.17、21、25、29、32、35、38、39、44、47、50、53、57中的一种，所述FR4的氨基酸序列选自SEQ ID NO.18、22、26、40、45、54、58中的一种；所述互补决定区由三个区域组成，分别为CDR1、CDR2、CDR3，其中所述CDR1的氨基酸序列选自SEQ ID NO.62、65、68、71、74、77、80、83、86、89、92、95、98、101中的一种，所述CDR2的氨基酸序列选自SEQ ID NO.63、66、69、72、75、78、81、84、87、90、93、96、99、102中的一种，所述CDR3的氨基酸序列选自SEQ ID NO.64、67、70、73、76、79、82、85、88、91、94、97、100、103中的一种；所述铰链区的氨基酸序列选自SEQ ID NO.59、60、61中的一种。